[发明专利]一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法

权利要求书

1.一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其步骤是：

A、在培养收获的产油微藻的湿藻泥、藻浆、干燥粉或发酵液中依次加入磷酸盐缓冲溶液、生物酶催化剂，搅拌反应体系并加热至25℃-60℃，启动微藻细胞壁酶催化降解反应；

B、酶催化降解反应完毕后，将步骤A中的反应体系调整pH值至7.5－9，将酶催化降解液温度提高至70－80℃并维持温度0.5-4小时；

C、待反应完毕后，将步骤B中酶催化降解体系的温度降低至40℃，并向反应体系中加入萃取剂进行油脂萃取操作，再加入破乳剂后通过离心进行分层；

D、将步骤C中分离获得的油相经减压蒸馏或薄膜蒸发浓缩获得微藻油脂，所述的减压蒸馏：操作温度40-60℃，真空度10mbar-500mbar；所述的薄膜蒸发：操作温度为60-80℃，转膜速度为50-200rpm，真空度为40mbar-200mbar；

所述的步骤A中的磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01-0.5M，所述的生物酶催化剂为甲壳素酶与果胶酶、碱性蛋白酶、纤维素酶、酯酶、甘露糖异构化酶、木瓜蛋白酶等生物酶中的一种或二至七种任意混合形成的复合酶；复合酶的用量为微藻干物质重量的0.1%-3.5%；酶催化降解反应的温度为25℃-60℃；酶催化降解反应的时间为：0.5小时-8小时；

所述的步骤C中的萃取剂为脂溶性不溶于水的溶剂为正己烷、环己烷、乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚；所述的破乳剂为无机盐溶液，食盐水或甲醇或乙醇。

2.根据权利要求1所述的一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于：所述的脂溶性是指物质能在非极性溶剂为苯、乙醚、四氯化碳、石油醚。

3.根据权利要求1所述的一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于：所述的离心分层为碟式连续离心或者管式离心，离心速率大于转速5000－6000rpm，分离因素Fr5000－6000。

4.根据权利要求1所述的一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于：所述的微藻为自养或异养发酵培养的小球藻、栅藻、雨生红球藻产油微藻。