[发明专利]一种基于多孔三氧化钨纳米花构建的真菌毒素传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于多孔三氧化钨纳米花构建的真菌毒素传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）依次用1.0、0.3、0.05μm的氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，分别在超纯水和乙醇中超声清洗，氮气吹干；

（2）在电极表面滴加6μL浓度为1~2mg/mL的多孔三氧化钨纳米花-天青I-壳聚糖-离子液体水溶液，干燥；

（3）继续将6μL浓度为5~20μg/mL的真菌毒素抗体溶液滴加到修饰电极表面，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（4）用3μL浓度为5~20mg/mL的牛血清白蛋白溶液封闭非特异性活性位点，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（5）将6μL浓度为0.0002~20ng/mL的一系列不同浓度的真菌毒素抗原用于和抗体的特异性识别，室温下孵化1h，清洗干净，于4℃冰箱中储存备用。

2.如权利要求1所述的一种基于多孔三氧化钨纳米花构建的真菌毒素传感器的制备方法，所述多孔三氧化钨纳米花-天青I-壳聚糖-离子液体的制备，其特征在于，步骤如下：

将浓度为1~4mmol/L的二水合钨酸钠分散在10mL的乙烯和25mL的水中，随后加入3mL浓度为1~4mmol/L的盐酸，搅拌30min后，将上述混合溶液转移到反应釜中，在80℃下反应12h，离心洗涤后干燥，得到多孔三氧化钨纳米花；

将1mL的1~4mg/mL多孔三氧化钨纳米花水溶液和1mL的1~4mg/mL天青I溶液混合，震荡12h后离心，加入含有0.4~1.6mL的离子液体的浓度为10mg/mL的壳聚糖溶液，继续震荡1h，离心后重新分散在1mL的水中，得到多孔三氧化钨纳米花-天青I-壳聚糖-离子液体水溶液；

所述壳聚糖为羧甲基壳聚糖，所述离子液体为1-丁基吡啶四氟硼酸盐。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于多孔三氧化钨纳米花构建的真菌毒素传感器对真菌毒素的检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10mL的pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

（2）选择差分脉冲伏安法对真菌毒素抗原进行检测，选择在-0.6~0V电压下进行扫描，记录电流变化；

（3）将待测样品溶液代替真菌毒素抗原标准溶液进行检测。

4.如权利要求1所述的一种基于多孔三氧化钨纳米花构建的真菌毒素传感器的制备方法，其特征在于，所述真菌毒素选自玉米赤霉烯酮、伏马毒素、T-2毒素、呕吐霉素、赭曲霉毒素和黄曲霉毒素B1。