[发明专利]检测苯霜灵的时间分辨荧光免疫试剂盒

权利要求书

1.一种检测苯霜灵的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于：由多孔包被板，缓冲液，苯霜灵标准品，苯霜灵的抗体冻干品，铕标记的羊抗鼠抗体，洗涤液和增强液所组成。

2.一种根据权利要求1所述检测苯霜灵的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括免疫原、包被原和单克隆抗体的制备以及样品前处理，其特征在于：

(1) 将苯霜灵与牛血清白蛋白偶联，得到免疫原；

(2) 将苯霜灵与卵血清蛋白偶联，得到包被原；

(3) 用步骤(1)的免疫原免疫小鼠，通过杂交瘤技术，得到分泌抗苯霜灵的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；

(4) 以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用Protein G柱进行纯化，获得抗苯霜灵的单克隆抗体

(5) 用步骤(2)的包被原包被固相载体；

(6) 将动物组织先经过酸解提取后，再过MAX柱净化，最后加入衍生试剂和催化剂进行处理，得到待测产物；

(7) 将步骤(6)的待检物进行测量荧光强度cps，对照标准曲线计算样品中的苯霜灵苯霜灵含量。

3.根据权利要求1所述检测苯霜灵的时间荧光免疫分析法试剂盒，其特征在于：所述的固相载体是多孔包被板，采用96孔的多微孔包被板作为固相载体。

4.根据权利要求1所述检测苯霜灵的时间荧光分辨免疫分析法试剂盒，其特征在于：所述的衍生试剂是丁胺。

5.根据权利要求1所述检测苯霜灵的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒，其特征在于：所述的催化剂是腈基磷酸二乙酯。

6.根据权利要求1所述检测苯霜灵的时间荧光免疫分析法试剂盒，其特征在于：所述步骤(6)和(7)具体为取包被有苯霜灵-OVA的微孔包被板，加入50 µL处理好的样品到各自的微孔中，加入50 µL以缓冲液稀释的苯霜灵抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗三次，加以缓冲液稀释的100 µL Eu³⁺-羊抗鼠抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗六次，加200 µL增强液振荡5分钟后测量荧光强度cps，从标准曲线计算样品中的苯霜灵含量。