[发明专利]一种制备9α-羟基-雄甾-1;4-二烯-3;17-二酮的方法

权利要求书

1.一种制备9α-羟基-雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）一个配制含有植物甾醇的发酵培养基的步骤；所述发酵培养基的配方如下：葡萄糖10.0-30.0g/L，磷酸二氢铵2.0-4.0g/L，柠檬酸铁铵0.03-0.08g/L，七水硫酸镁1.5-3.5g/L，磷酸氢二钾0.5-1.5g/L，磷酸二氢钾0.5-1.5g/L，甜菜糖蜜 5.0-9.0g/L ，植物甾醇30.0-40.0g/L；

2）在所述的发酵培养基中加入复合促溶剂，所述的复合促溶剂由乙醇和聚乙二醇组成，在所述的发酵培养基中，所述的乙醇的浓度为10.0-50.0g/L，所述的聚乙二醇的浓度为5.0-20.0g/L；

3）一个分别接种分枝杆菌Mycobacterium和玫瑰色红球菌Rhodococcus rhodochrous的步骤，分枝杆菌Mycobacterium的接种量为10.0-15.0%，转化培养0-48h后，再接入10.0-20.0%的玫瑰色红球菌Rhodococcus rhodochrous，发酵温度为28-32℃，发酵时间为72-120h，发酵培养基pH在6.5-7.5之间；所述的分枝杆菌Mycobacterium的保藏号为CICC21097，来自中国工业微生物菌种保藏管理中心；所述的玫瑰色红球菌Rhodococcus rhodochrous的保藏号为CGMCC 4.1480，来自中国普通微生物菌种保藏管理中心；

4）一个产物提取精制的步骤，发酵结束后，将发酵液70-90℃灭活，冷却到20-30℃后，板框压滤，取滤饼进行萃取，再经过滤、脱色、蒸馏、精制，得到9α-羟基-雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮。