[发明专利]一种灵长类实验动物精子质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种灵长类实验动物精子质量检测方法。

背景技术

目前常见的精子质量分析方法只适用于人类精液，灵长类实验动物精液采集较为困难，常用的电刺激采集精液的方式容易引起动物组织损伤，影响其他指标的检测。另外，电刺激采集精液需要的时间较长，成功率较低，达不到灵长类实验动物的精子质量分析要求。

精子活力分析是评估雄性生育能力最常用的检查方法,计算机辅助精子分析(computeraidedspermanalysis,CASA)将计算机技术和先进的图像处理技术应用于精子质量分析，通过对精子动态图像分析，提供精子动力学的量化数据，其检测过程迅速，客观精确，分析效率高，不易受检查者技术熟练程度和主观因素的影响。

精子形态学分析可以在光学显微镜下对染色后的精子进行观察，直观地反映出精子发育状态，畸形精子率等，以此判断灵长类实验动物的精子质量。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种灵长类动物精子质量检测试剂盒。

本发明提供的试剂盒，其包括精子获能液；所述精子获能液按照如下方法制备：将NaCl、KCl、MgCl₂、CaCl₂、NaH₂PO₄、NaHCO₃、葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠、Hepes(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)、BSA、硫酸庆大霉素和纯水混合，得到精子获能液，其中，所述NaCl的浓度为114mM，所述KCl的浓度为3.2mM，所述MgCl₂的浓度为0.5mM，所述CaCl₂的浓度为2.0mM,所述NaH₂PO₄的浓度为0.4mM，所述NaHCO₃的浓度为24.9mM，所述葡萄糖的浓度为5.6mM，所述丙酮酸钠的浓度为0.5mM，所述乳酸钠的浓度为10mM，所述Hepes的浓度为10mM，所述BSA的浓度为3g/L，所述硫酸庆大霉素30mg/L。

上述的试剂盒或上述精子获能液在检测离体灵长类动物精子质量中的应用也是本发明保护的范围；

或上述的试剂盒或上述精子获能液在制备检测离体灵长类动物精子质量产品中的应用也是本发明保护的范围。

上述的试剂盒或上述精子获能液在获取离体灵长类动物精子中的应用也是本发明保护的范围；

或上述的试剂盒或上述精子获能液在制备获取离体灵长类动物精子产品中的应用也是本发明保护的范围。

本发明另一个目的是提供一种检测离体灵长类动物精子质量的方法，包括如下步骤：

1)将离体灵长类动物精子置于是述精子获能液中，反应，得到精子悬液；

2)检测所述精子悬液的精子质量。

上述方法中，所述反应的温度为37度，所述反应的时间为5min。

上述方法中，所述检测包括精子运动指标检测或精子形态检测；

所述精子运动指标检测采用CASA分析系统；

所述精子形态检测采用光学显微镜。

上述方法中，所述灵长类动物精子来源于所述灵长类动物附睾尾。

上述灵长类动物为灵长类实验动物。上述灵长类实验动物具体为猴。上述猴尤其具体为食蟹猴。

本发明的实验证明，本发明的精子获能液可以用来检测食蟹猴精子质量，用其悬浮离体精液，能保持精子活力，用本发明的精子获能液接检测出食蟹猴精子活力高。本发明的精子获能液可以用于检测灵长类实验动物精子质量。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、灵长类实验动物精子质量检测方法

1、精子获能液的配制