[发明专利]芽孢杆菌DY26-004及其在防治植物致病真菌的应用

说明书

芽孢杆菌DY26‑004及其在防治植物致病真菌的应用，涉及芽孢杆菌。所述芽孢杆菌(Bacillus sp.)DY26‑004的保藏编号为CCTCC NO：M 2015406。该菌株具有如下特征：对多种植物病原真菌(镰刀菌、香蕉炭疽菌、宛氏拟青霉、核盘菌、长柄链格孢、绿色木霉、立枯丝核菌、互生链格孢、灰霉菌、胶孢炭疽菌)具有较强的抑制作用。在油菜菌核病菌防治和小麦赤霉病防治的盆栽试验中有较好的生物防治效果，防效分别为72％和65％。芽孢杆菌DY26‑004无毒无致病性，对环境友好，是微生物农药研发的有用资源，具有潜在的应用前景。

技术领域

本发明涉及芽孢杆菌，尤其是涉及一株芽孢杆菌DY26-004及其在制备防治植物致病真菌发酵上清液中的应用。

背景技术

植物病害一直是影响农业生产的重要因素之一，化学农药的长期大量使用不仅催生了病原菌的抗药性，而且农药残留对人、畜和环境都有危害。生物防治是利用有益生物或其产物来抑制或消灭有害生物的一种方法，由于其无毒害、无污染和不易产生抗药性的优点，使其成为防治植物病害研究中的一个新方向(Calvo et al.2007)。细菌由于生长周期短，代谢易于调控，可通过发酵实现大规模生产的特点，被广泛应用于植物病害防治的研究。芽胞杆菌(Bacillus)、假单胞菌(Pseudomonas)、节杆菌(Arthrobacter)和沙雷氏菌(Serratia)等都在控制植物真菌性病害上具有明显效果(Basha and Ulaganathan.2002)。

目前用于生物防治的微生物菌株多数来自于陆地，而多年来对陆地微生物的筛选，导致筛选到产生新型抗病机制的微生物越来越少。因而人们逐渐把目光投向了海洋，希望从海洋环境中开发出新型抗病原菌活性物质，用于植物病害的生物防治。海洋微生物相对于陆地微生物而言，一直处于海洋特有的高盐、高压、低氧、低光照等极端条件，导致其在物种、基因组成和生态功能上的多样性(李越中，陈琦.1998)。海洋微生物活性物质的开发利用研究进展迅速,人们已从放线菌、真菌、细菌、微藻等海洋微生物中分离出具有抗肿瘤、抗菌、免疫调节功能以及其它用途的生物活性物质。

据报道，芽孢杆菌对多种由植物病原真菌所引起的植物病害具有良好的拮抗和防治效果。在水稻中，由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的纹枯病、由稻梨孢(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病；在谷物中，由禾白粉菌(Erysiphe raminis)引起的禾谷类白粉病等；在蔬菜中由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病、由尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)引起的枯萎病以及由瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)引起的根腐病，等。由此可见，芽孢杆菌是筛选拮抗植物病原真菌生防菌有效来源之一(齐爱勇，等.2011)。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一株芽孢杆菌(Bacillus sp.)DY26-004。

本发明的目的之二在于提供一种芽孢杆菌(Bacillus sp.)DY26-004在制备防治植物致病真菌发酵上清液中的应用。

所述芽孢杆菌(Bacillus sp.)DY26-004分离自中国第26次大洋科学考查所采集的沉积泥样品(S003站点；w63°45.3496′，S3°39.8693′)；该菌已于2015年6月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，中国典型培养物保藏中心的地址为中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏中心保藏编号为CCTCC NO：M 2015406。

通过聚合酶链式反应(PCR)扩增DY26-004 16S rDNA序列，与美国国家生物技术信息中心(NCBI)GenBank数据库中相应的序列进行比对分析，发现其与芽孢杆菌属(Bacillussp.)具有99％的序列相似性；其16S rDNA序列的GenBank登录号为KT270352。

所述芽孢杆菌(Bacillus sp.)DY26-004的16S rDNA部分序列如下：