[发明专利]一种用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂及制备方法

说明书

本发明涉及一种用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂。该菌剂由吉氏贪铜菌制成，为球形固体颗粒，表面光滑，富有弹性，机械强度好，吉氏贪铜菌保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏日期：2015年8月7日，保藏号CGMCC No：11179。该菌剂的制备操作步骤如下：1.在LB固体培养基中活化吉氏贪铜菌，得到活化菌种；2.将活化菌种接种于LB液体培养基中，摇床培养，得到菌悬液；3.将菌悬液离心分离得到湿菌体；将湿菌体和海藻酸钠水溶液混合得到混合液；将混合液加入到等体积的氯化钙溶液中，静置，过滤，收集沉淀的固体物质，即得到球形固体颗粒状的用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂。通过降解实验发现，该菌剂对2,4‑D的降解效果良好。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及苯氧羧酸类除草剂残留污染物的降解，具体涉及一种降解2,4-二氯苯氧乙酸的菌剂。

背景技术

2,4-二氯苯氧乙酸是一种苯氧羧酸类除草剂，世界上使用最广泛的除草剂之一。目前其在我国获得登记品种主要是2,4-苯氧乙酸钠，2,4-二氯苯氧乙酸丁酯，2,4-二氯苯氧乙酸异辛酯，2,4-二氯苯氧乙酸二甲胺盐等，因其成本低、效果好被广泛使用，我国目前登记的2,4-D类产品多达264个生产企业，其产品在生产上用量最高可达1402.7ga.i./ha，远高于一般除草剂的用量。2,4-D的盐、酯产品在土壤易代谢成2,4-D，危害后茬敏感作物，2,4-D可通过地表径流或雨水冲刷进入水体，进而污染水体。

2,4-D降解的处理方法主要有微生物降解、光催化氧化、Fenton氧化、电离辐射等，其中光催化氧化、Fenton氧化、电离辐射处理方法不易于实际中污染场地的原位修复，且处理成本高。微生物修复具有安全、快速、费用低廉的优点，因此被称为环境友好替代技术，一直是国内外的研究热点。

吉氏贪铜菌(Cupriavidus gilardii)对2,4-D具有良好的降解效果。其中2,4-D的代谢产物2,4-二氯苯酚(2,4-DCP)和3,5-二氯儿茶酚(3,5-DCC)均对人的眼睛、皮肤和呼吸道具有刺激性，2,4-二氯苯酚还对水生物有毒。该菌在降解2,4-D的同时，也能完全降解代谢产物2,4-DCP和3,5-DCC。因此将该降解菌制成菌剂，可望为苯氧羧酸类除草剂残留污染生物修复提供种质资源和技术支撑。

发明内容

为了解决苯氧羧酸类除草剂的残留问题，本发明提供一种用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂及制备方法。

一种用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂由吉氏贪铜菌(Cupriavidusgilardii)制成，为球形固体颗粒，表面光滑，富有弹性，机械强度好，耐微生物分解和溶液冲击能力强。

吉氏贪铜菌(Cupriavidus gilardii)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2015年8月7日，保藏号CGMCC No：11179。

制备用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂的操作步骤如下：

(1)菌种活化

在LB固体培养基中活化吉氏贪铜菌，得到活化菌种；

(2)菌液培养

将活化菌种接种于LB液体培养基中，摇床培养，得到菌悬液；

(3)菌剂制备

将菌悬液离心分离得到湿菌体；将3g湿菌体和100mL海藻酸钠水溶液混合得到混合液；将混合液加入到等体积的氯化钙溶液中，静置，过滤，收集沉淀的固体物质，即得到球形固体颗粒状的用于降解苯氧羧酸类除草剂残留的菌剂。

本发明的有益技术效果体现在以下方面：

1.本发明的菌剂对50.0mg·L^-12,4-D培养12h后降解率达到51.9％，24h后降解率为97.9％，基本降解完全。