[发明专利]一种检测水产品中甲砜霉素残留量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种采用固相萃取－气相色谱法检测水产品中甲砜霉素残留量的方

法，属于食品检测领域。

背景技术

氯霉素类药物是一类广谱抗生素，主要包括氯霉素(CAP)、甲砜霉素(TAP)、氟苯尼考(FF)，主要用于防治畜禽和水产动物的细菌性疾病。氯霉素因其存在严重的毒副作用，加其稳定的化学性质，被我国、美国和欧盟等许多国家禁止用于可食用动物。甲砜霉素毒性较氯霉素小，效果好，是替代氯霉素的理想药物。欧盟规定所有动物性食品可食性组织中甲砜霉素最高残留限量为50μg / kg，我国农业部 235 号公告中规定的动物性食品中甲砜霉素的最高残留限量与欧盟相同，均为50μg / kg。

现在我国水产养殖业中实际存在着甲砜霉素可能使用的现状。建立检测方法标准对水产动物源性食品中氯霉素进行监控，对保证水产养殖业持续健康发展具有重要意义。

动物组织中氯霉素类药物残留检测报道较多，主要包括酶联免疫检测法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相色谱－质谱法(LC-MS)、气相色谱－质谱法(GC-MS)。

发明内容

本研究确立了气相色谱法同时测定水产品中的氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺，为水产品中氯霉素类药物残留的监控提供简便、快速、实用的检测方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种采用固相萃取－气相色谱

法检测水产品中甲砜霉素残留量的方法，包括样品提取和分析方法测定步骤,其创新在于：所述的分析测定步骤中气相色谱仪的气相条件设置为采用毛细管色谱柱为DB-5MS石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25μm；柱温初始温度80℃，升温到 280℃。

进一步的，所述样品分析步骤包括样品处理、标准曲线的配制及测定和样品测定。

进一步的，所述样品处理根据国家标准进行处理。

进一步的，所述标准曲线的配制及测定根据国家标准将标准曲线进行配制。

进一步的，所述样品测定为测定标准系列的操作条件测定样品和样品的空白，测得的样品和空白样品的峰高或峰面积值，由标准曲线或回归方程得所测样品的浓度。

本发明的有益效果：本发明的这种采用气相色谱法，选用采用毛细管色谱柱为DB-5MS石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25μm；柱温初始温度80℃，升温到280℃。检测水产品中甲砜霉素残留量结果检测数据准确，符合国家要求，省时高效。选用气相色谱测定需要衍生化后才能测定，回收率为71.8% ～105%，最低检出浓度为0.3μg / kg，可以满足对水产品中甲砜霉素残留量的检测要求。

附图说明

图1为标准溶液、标样品、空白样品的色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施对本发明的技术方案做详细说明。

采用固相萃取－气相色谱法检测水产品中甲砜霉素残留量的方法：

1、仪器：

CP-3800气相色谱仪( ECD 检测器)；

SZSB-148固相萃取仪；

自动高速冷冻离心机。

2、试剂：

甲砜霉素标准品（纯度＞98. 6%） ；

氟苯尼考胺标准品(纯度＞98.0% )；

衍生化试剂:N，O-双(三甲基硅烷基) 三氟乙酰胺(BSTFA):三甲基氯硅烷(TMCS)(99:1，V/V)；

MCX、Oasis HLB 固相萃取小柱；

乙酸( 色谱纯);氨水(分析纯)；

甲醇、乙腈、乙酸乙酯、甲苯(色谱纯)；

超纯水( 电阻率为18. 2 MΩ·cm)。

3、分析测定：

样品制备与提取：鱼去鳞，沿脊背取肌肉(带皮);虾，去头、去壳、去附肢，取可食肌肉部分;贝类，去壳，取可食部分;海参、甲鱼，取可食肌肉部分。样品切为不大于 0. 5cm×0. 5cm×0. 5cm 的小块后混匀，高速搅碎机充分搅匀，密封，标记，－18℃以下冷冻保存。称取样品 (5. 00±0. 01 ) g，于50 mL离心管中，加乙酸乙酯:氨水(98:2，V/V)20 mL，立即涡旋1min，使其分散，超声振荡提取15 min，4000 r / min离心5 min，取上清液于100 mL鸡心瓶中，残渣中加乙酸乙酯:氨水(98:2，V/V)20mL，重复提取一次，合并两次上清液，并加入体积分数5%乙酸溶液3mL，振荡混匀，40℃下旋转蒸发至约1. 5 mL，备用。