[发明专利]一种从蔷薇红景天提取原花青素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物加工科学领域，特别是一种从蔷薇红景天提取原花青素的方法。

背景技术

原花青素(Procyanidins，简称OPC)又被称为低聚黄烷酮类，是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。

原花青素是自然界酚类化合物中最丰富的种类，原花青素因在酸介质下发生典型氧化降解反应产生有色的花青素而得名。在各类原花青素中二聚体是分布最广、研究最多的一类原花青素。国内外已经报道了很多关于原花青素的药理学作用，例如清除自由基、强抗氧化性、抗肿瘤以及抗动脉硬化等功能；原花青素也已经用来防止糖尿病患者白内障手术后的并发症；此外原花青素在植物防御捕食者和微生物机理方面也起到了重要作用。鉴于原花青素具有如此广泛的作用，其提取方法也受到了国内外研究人员的极大关注。传统提取原花青素主要采用有机溶剂浸提、超滤反渗透分离和树脂吸附等方法。

在现有技术中，申请号为200410053240的中国专利申请公开了一种名为“一种高含量原花青素的制备方法”的专利文献，该方法以葡萄籽为起始原料，经溶剂提取、柱层析分离和溶剂沉淀过程得到高含量的原花青素。溶剂粗提物的原花青素含量约为50％，经大孔吸附树脂柱层析精制将原花青素含量提高到80％以上，最后经一次溶剂沉淀可以将原花青素含量提高到95％以上。申请号为CN03117429.9的中国专利申请公开了一种名为“一种分离提取松树皮低聚体原花青素的方法”，该方法的生产工艺流程为：原药材→前处理→提取→回收溶媒、浓缩→固液分离→浓缩→高效逆流萃取→浓缩→干燥→灭菌、包装，其中采用水为提取溶媒，乙酸乙酯为萃取溶媒。申请号为CN02144708.X的中国专利公开了一种名为“一种葡萄籽中原花青素低温提取方法”，该方法以葡萄籽为原料，采用甲醇、正丁醇与盐酸混合溶液提取，加入浓盐酸，使提取液中酸重量浓度为0.1～0.8％，过滤，回收溶剂中甲醇、正丁醇，水液用氯仿、正丁醇萃取，回收溶剂氯仿、正丁醇，水液低温沉降，沉降温度为0～-20℃，干燥得成品。

以上几种方法存在以下几点缺陷：(1)大孔树脂吸附之前，未经过除杂，这样杂质容易堵塞树脂，造成树脂污染，原花青素吸附量下降；(2)适用浓盐酸、甲醇等有害物质，不利于原花青素在食品、医药、化妆品中的应用；(3)有些条件不容易达到，如低温；(4)这些方法普遍存在着工艺复杂、使用有机溶剂、分离效率低以及产品质量不稳定等问题；（5）上述原花青素的提取方法均未采用酶制剂，影响原花青素的提取率。

发明内容

本发明的目的是克服现有提取方法的不足，提出一种利用酶制剂结合溶剂从蔷薇红景天中提取原花青素的方法。此方法所得到的原花青素产品可用于医药保健及化妆品等行业。

本发明的一种从蔷薇红景天提取原花青素的方法，原料为蔷薇红景天，试剂有果胶酶(30000IU)，纤维素酶(15000IU)，95%乙醇（食品级），柠檬酸（食品级），磷酸氢二钠（食品级）。

本发明的一种从蔷薇红景天提取原花青素的方法，由以下步骤组成：

(1)备料：将蔷薇红景天进行恒温减压干燥，粉碎称量后，40目过筛，得到原料干粉备用；

(2)配制缓冲溶液：将0.1mol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1：1.5～2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液：

(3)配制酶液：混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按原料干粉重量(kg)：缓冲溶液体积(L)=1：15～30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1～0:3g果胶酶与0.1～0.3g纤维素酶；

(4)投料：按原料干粉重量(kg)：缓冲溶液体积(L)=1：15～30的比例，将原料干粉加入酶液中；

(5)酶解：将原料干粉与酶液搅拌均匀后，在50～55℃的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物；

(6)提取：按每kg原料干粉加入15～30L的75～95%乙醇的方法，将75～95%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60～65℃条件下提取2～3h，经过滤，得到提取液；

(7)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。