[发明专利]一种从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法及检测维生素K2的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学领域，特别涉及一种从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法及检测维生素K2的方法。

背景技术

维生素K2，也称为甲萘醌，其结构是由一个甲基萘醌母环和一条位于母环C-3位置上的异戊二烯侧链组成，根据侧链上异戊二烯单元个数差异，维生素K2共分为14种，以MK-n表示，MK-7即侧链上含有7个异戊二烯单元。维生素K2具有促进凝血、防治骨质疏松、改善动脉硬化、防治肝癌和白血病等药理活性。

维生素K2遇碱和见光均不稳定，容易分解，而耐热、耐酸。复方制剂中维生素K2通过微囊包埋技术增加稳定性。微囊包埋膜是高分子材料，而维生素K2是脂溶性维生素，提取维生素K2必需用有机溶剂，但是有机溶剂不能溶解高分子微囊包埋膜，加之维生素K2不稳定，从而造成维生素K2含量测定难度很大；因此，目前已报道文献的方法均不能测定微囊包埋的维生素K2。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法及检测维生素K2的方法。本发明建立了反相高效液相色谱法测定微囊包埋的维生素K2，为维生素K2复方制剂的质量标准提供依据。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法，包括如下步骤：

步骤1：取所述维生素K2包埋剂与酸混合后超声；

步骤2：取步骤1的产物与有机溶剂混合后超声；

步骤3：取步骤2的产物与有机溶剂混合。

在本发明的一些具体实施方案中，以g/mmol计，所述维生素K2包埋剂与酸的质量摩尔比为(0.5～1)：(1～3)。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤1或步骤2中所述超声的时间为5～15min。

在本发明的一些具体实施方案中，所述酸的浓度为2～4mol/L。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤2或步骤3中的所述有机溶剂包括无水乙醇或乙酸乙酯中的一种或两种。步骤2或步骤3中的所述有机溶剂可以相同也可以不相同。

在本发明的一些具体实施方案中，以g/mL计，维生素K2包埋剂与步骤2中所述有机溶剂的质量体积比为(0.5～1)：(10～15)。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤3中所述有机溶剂的添加量为定容止容量瓶刻度线为准。

在本发明的一些具体实施方案中，与有机溶剂混合后还包括过滤、纯化的步骤。

在本发明的一些具体实施方案中，所述纯化为经高效液相色谱纯化；所述高效液相色谱的流动相为异丙醇、甲醇和0.1％(v/v)乙酸溶液；所述异丙醇、甲醇和0.1％乙酸溶液的体积比为(400～500)：(450～500)：(15～30)。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤2所述高效液相色谱的流速为0.8～1.2mL/min。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤2所述高效液相色谱的的柱温为35～40℃。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤1或步骤2中所述超声的频率为45khz、所述超声的功率1kw。

具体的，本发明提供的从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法为：精密称取0.5-1g样品，置于25-50ml棕色容量瓶，加入2-4mol/L的酸溶液1-3ml，摇匀，超声(频率为45khz、功率1kw)5-15min，加入10～15mL无水乙醇，超声(频率为45khz、功率1kw)5-15min，放冷，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，经0.45μm的滤膜过滤，即得供试液。

具体的，本发明提供的从维生素K2包埋剂中提取维生素K2的方法为：精密称取0.5g样品，置于25ml棕色容量瓶，加入3.2mol/L的盐酸溶液2.00ml，摇匀，超声(频率为45khz、功率1kw)10min，加入10～15mL无水乙醇，超声(频率为45khz、功率1kw)5min，放冷，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，经0.45μm的滤膜过滤，即得供试液。

本发明还提供了一种检测维生素K2包埋剂中维生素K2的方法，包括如下步骤：

步骤1：根据上述方法从维生素K2包埋剂中提取维生素K2；

步骤2：获得维生素K2包埋剂中维生素K2的含量。

在本发明的一些具体实施方案中，获得维生素K2包埋剂中维生素K2的含量的方法为经紫外检测器检测，并用外标法定量。

在本发明的一些具体实施方案中，维生素K2包埋剂中维生素K2的含量计算公式为：

X＝C×V/M×K

式中：X—样品维生素K2的含量，mg/100g；