[发明专利]基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法有效
申请号: | 201510671518.2 | 申请日: | 2015-10-15 |
公开(公告)号: | CN105334189B | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 黄耀熊 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | G01N21/41 | 分类号: | G01N21/41 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 谢静娜 |
地址: | 510632 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 透镜 成像 抗原 抗体 反应 测定 方法 | ||
1.基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,先将微透镜浸没在带有抗原的样品溶液中,在平行光照射下,所成的像是一外周边缘为暗环的亮圆;再滴入抗体溶液,抗原抗体发生的反应使得溶液折射率发生变化,从而使得微透镜像的暗环粗细发生变化,通过测定暗环的粗细变化并按照用几何光学原理推导出的方程式计算折射率在抗原抗体反应前后发生的变化,将变化量的大小与抗原浓度的关系标定曲线,定性确定是否发生抗原抗体反应并定量确定参与反应的抗原浓度;其中,所述微透镜是一端为球面,另一端为平面的微透镜,对于微透镜推导出的方程式为:
式中,n1为抗原抗体溶液的折射率,n2为微透镜的折射率,Rb为暗环内亮圆的半径,R为微透镜的半径。
2.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述微透镜为由光学透明材料制成的微透镜。
3.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述平行光照射的方式是:通过由透镜组组成的平行光照明系统或相衬显微镜进行照射。
4.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述带有抗原的样品溶液为临床血液、血清、体液样品、食品溶液、防疫与环保现场获得的溶液或人工配制的带有抗原的样品溶液。
5.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述抗体溶液为带有过量抗体配制的溶液。
6.根据权利要求5所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述抗体溶液是由血清与过量抗体配制的溶液,或者由生物溶液、水溶液与过量抗体配制的溶液。
7.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述抗原溶液的用量以浸没微透镜为准;所述抗体溶液与带有抗原的样品溶液等容积。
8.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述抗原抗体发生反应前后溶液折射率的变化为Δn,Δn为仅有抗原溶液或样品溶液时微透镜测得的溶液折射率与抗体溶液滴入后5-100秒间微透镜测得的5-100次溶液折射率的平均值之间的差值。
9.根据权利要求8所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述折射率在抗原抗体反应前后发生的变化大小与抗原浓度的关系标定曲线,为通过配制不同浓度的抗原溶液,分别测定对应每一浓度情况下的Δn之后,所得到的Δn与抗原浓度的关系曲线。
10.根据权利要求1所述基于微透镜成像的抗原抗体反应测定方法,其特征在于,所述抗原抗体反应测定时,利用动态监测抗原抗体反应过程的折射率随时间的变化,测定抗原抗体反应动态学参数,参数包括抗原抗体复合物的生成常数ka和解离常数kd。
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