[发明专利]一种辅助筛选抗条锈病小麦的方法及其专用引物在审
申请号: | 201510673193.1 | 申请日: | 2015-10-16 |
公开(公告)号: | CN105255866A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 陈璨;夏先春;何中虎;卢家玲 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辅助 筛选 条锈病 小麦 方法 及其 专用 引物 | ||
1.引物组合,为如下(a)或(b)或(c):
(a)wmc658引物对和wsnp_ex_c10555_17235832引物组;
(b)所述wmc658引物对;
(c)所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组;
所述wmc658引物对为能扩增片段A的引物对;所述片段A为以小麦基因组DNA为模板采用序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成的引物对进行PCR扩增得到的片段;
所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组为能扩增片段B的引物对;所述片段B为以小麦基因组DNA为模板采用序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子组成的引物组进行PCR扩增得到的片段。
2.如权利要求1所述的引物组合,其特征在于:
所述wmc658引物对由序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成;
所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组由序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子组成。
3.权利要求1或2所述引物组合在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的用途为如下(Ⅰ)或(Ⅱ):(Ⅰ)辅助筛选抗条锈病植物;(Ⅱ)辅助鉴定植物的抗条锈病性状。
4.含有权利要求1或2所述引物组合的试剂盒;所述试剂盒的用途为如下(Ⅰ)或(Ⅱ):(Ⅰ)辅助筛选抗条锈病植物;(Ⅱ)辅助鉴定植物的抗条锈病性状。
5.权利要求4所述试剂盒的制备方法,包括将权利要求1或2所述引物组合中的每条引物独立包装的步骤。
6.一种辅助鉴定待测小麦的抗条锈病性状的方法,包括如下步骤:
以待测小麦的基因组DNA为模板,分别采用wmc658引物对和wsnp_ex_c10555_17235832引物组进行PCR扩增;
如果采用所述wmc658引物对进行PCR扩增得到的扩增产物中具有242bp的特异片段且采用所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组进行PCR扩增得到的扩增产物中目标SNP的基因型为非CC纯合型,待测小麦为候选的具有抗条锈病性状的小麦;如果采用所述wmc658引物对进行PCR扩增得到的扩增产物中不具有242bp的特异片段且采用所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组进行PCR扩增得到的扩增产物中所述目标SNP的基因型为CC纯合型,待测小麦为候选的具有感条锈病性状的小麦;所述非CC纯合型为TT纯合型或TC杂合型;所述目标SNP为小麦基因组中的序列表的序列8所示核苷酸序列中的第24位核苷酸;
所述wmc658引物对由序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成;所述wsnp_ex_c10555_17235832引物组由序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子组成。
7.一种辅助筛选抗条锈病小麦的方法,包括如下步骤:按照权利要求6所述方法鉴定待测小麦的抗条锈病性状性状,筛选具有高抗条锈病性状的小麦。
8.一种辅助鉴定待测小麦的抗条锈病性状的方法,包括如下步骤:
以待测小麦的基因组DNA为模板,采用wmc658引物对进行PCR扩增;
如果PCR扩增产物中具有242bp的特异片段,待测小麦为候选的具有抗条锈病性状的小麦;如果PCR扩增产物中不具有242bp的特异片段,待测小麦为候选的具有感条锈病性状的小麦;
所述wmc658引物对由序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成。
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