[发明专利]一种绿色木霉菌菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种绿色木霉菌菌株及其应用，所述菌株为绿色木霉菌菌株Tvir‑6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10922。绿色木霉菌菌株Tvir‑6制备的生防种衣剂在防治根结线虫中的应用。绿色木霉菌Tvir‑6菌株为从土壤中分离到的真菌，对作物安全无害，且对根结线虫具有防治作用，在应用中具有安全性，适用于根结线虫的生物防治。绿色木霉菌Tvir‑6菌株发酵液对根结线虫二龄幼虫的致死率达到99％以上，在温室中的防治效果达到79.5％，防治效果高且稳定，适于农业生产需求。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种绿色木霉菌菌株及其应用。

背景技术

根结线虫(Meloidogyne)是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫。已知危害蔬菜的线虫主要有花生根结线虫、北方根结线虫、南方根结线虫、爪哇根结线虫以及甜菜根结线虫等。线虫寄主范围广泛，常危害瓜类、茄果类、豆类及萝卜、葫萝卜、莴苣、白菜等30多种蔬菜，还能传播一些真菌和细菌性病害。根结线虫是一种重要的农作物病原物，每年造成大约数十亿的损失。根结线虫主要侵染农作物的根部，侵染后的根部膨大形成巨大的根结，可互连接形成串珠状，由于根部被破坏，影响正常的吸收机能，所以地上部生长发育受阻，被侵染后的植株地上部表现矮化，叶部黄化，结果小而且少。天气干燥时易萎蔫或枯萎。长期连作的温室中，特别是西甜瓜、黄瓜、番茄等作物上甚至造成绝产。

由于抗根结线虫病的种质资源稀少，所以在生产中化学防治仍然是防治根结线虫的重要措施，如棉隆、氯化苦和百亩威等，这些药剂虽然杀虫快，但是会严重降低蔬菜质量，污染环境，破坏生态平衡，使用过程中对人、畜不安全，因此生物防治措施日益受到人们的关注。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中化学防治存在的污染环境、不安全的问题，提供一种绿色木霉菌菌株及其应用。

为实现上述目的，本发明提供了一种绿色木霉菌菌株，其微生物保藏编号为CGMCCNO.10922；分类命名是：Trichoderma virens；保藏时间：2015年5月27日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏单位：保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)。

本发明还提供了绿色木霉菌菌株制备的生防种衣剂。

本发明还提供了绿色木霉菌菌株制备的生防种衣剂在防治根结线虫中的应用。

优选的，所述根结线虫为南方根结线虫和/或北方根结线虫。

本发明还提供了绿色木霉菌菌株用于制备生防种衣剂的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将绿色木霉菌菌株Tvir-6接种于PDB培养基中振荡培养，获得孢子浓度为10⁷-10¹⁰/ml的孢子悬浮液；

(2)将步骤(1)的孢子悬浮液1-2L与硅藻土500-700g、玉米粉200-400g、麦麸50-150g混合均匀后，进行固体发酵，得到固体发酵物；

(3)将步骤(2)的固体发酵物粉碎，过60目筛，得到孢子粉，孢子粉与粘着剂、分散剂、防腐剂混合后，制备得到生防种衣剂。

优选的，步骤(1)中PDB培养基配方为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，余量为水。

优选的，步骤(1)中培养条件为25-28℃，振荡培养6-8天。

优选的，步骤(2)中，在28-30℃条件下进行固体发酵，发酵6-8天后，于室温条件下干燥3-5天，得到固体发酵物。

优选的，步骤(3)中，孢子粉、粘着剂、分散剂、防腐剂的质量比为85-90：1-3：8-10：1-2。