[发明专利]一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法

权利要求书

1.一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，所述选育抗/耐草甘膦新种质的方法利用不同浓度梯度的草甘膦处理苗期野生大豆筛选出对草甘膦具有抗/耐性的野生大豆，然后利用筛选出的具有抗/耐性的野生大豆与栽培大豆进行种间杂交，获种间杂交后代，对所述种间杂交后代的自交系进行草甘膦抗/耐性筛选结合表型筛选选育出对草甘膦具有抗/耐性的新种质。

2.根据权利要求1所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，所述选育抗/耐草甘膦新种质的方法包括如下步骤：

（1）待鉴定野生大豆播种前的处理：在待鉴定野生大豆的种子籽粒中央背对子脐处，去掉2mm×2mm大小的种皮，处理后的种子放入3-6℃冰箱待用；

（2）野生大豆对草甘膦抗性的鉴定：种植步骤（1）处理后的待鉴定野生大豆，采用田间鉴定的方法鉴定所述待鉴定野生大豆对草甘膦的抗/耐抗性，设置10-15个草甘膦处理浓度，每个所述草甘膦处理浓度对应设置一个试验小区，在每个所述试验小区内种植所述待鉴定野生大豆，所述待鉴定野生大豆按穴种植，设置重复组以及空白对照组，种植的野生大豆的两片三出复叶完全展开时，向所述两片三出复叶均匀喷施草甘膦；

（3）野生大豆草甘膦抗性级别的评价：步骤（2）处理后的第7天对喷药后的野生大豆植株的表型进行观察，所述表型观察的对象为枯叶的面积比例，并根据所观察到的表型确定野生大豆对草甘膦的抗性级别，并对不同处理浓度下所述待鉴定野生大豆的抗性级别进行统计；

（4）抗性资源的确定：根据步骤（3）获得的所述待鉴定野生大豆抗性级别数据，进行频数统计以及方差分析以确定用于筛选抗/耐草甘膦野生大豆的最适合的草甘膦处理浓度；对所述最适合的草甘膦处理浓度下的所有待鉴定野生大豆的抗性进行多重比较分析，以找出对草甘膦的抗/耐性与其他野生大豆相比差异显著的野生大豆，将所述对草甘膦的抗性/耐性差异显著的野生大豆资源确定为具有抗/耐性的野生大豆

（5）种间杂交创制新种质：选择合丰47号作为母本，以步骤（4）中筛选出具有抗/耐性的野生大豆为父本进行杂交育种，获得F0代杂交粒，收集杂交粒进行保藏；

（6）种间杂交后代草甘膦抗性鉴定、表型筛选：继续种植步骤（5）收获的F0代杂交粒，对自交后代F2直到F5按步骤（1）至步骤（5）所述方法进行草甘膦抗性筛选，并结合后代表型筛选优良后代继续进行自交繁殖，根据显著性分析确定优良种间后代，筛选出抗草甘膦新种质。

3.根据权利要求2所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，步骤（2）中所述喷施的草甘膦为41%草甘膦异丙盐水剂。

4.根据权利要求2所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，步骤（2）野生大豆对草甘膦抗性的鉴定中，设置10个草甘膦处理浓度，所述设置的10个草甘膦处理浓度分别为0ml/亩，25ml/亩，50ml/亩，100ml/亩，125ml/亩，150ml/亩，175ml/亩，200ml/亩，225ml/亩，250ml/亩。

5.根据权利要求2所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，步骤（3）中所述根据表型确定野生大豆对草甘膦的抗性级别的方法是建立抗性标准评价体系，所述抗性标准评价体系根据枯叶面积比例将待鉴定野生大豆的抗性级别分为：0级、1级、2级、3级、4级及5级，所述抗性级别从0级到5级对应的枯叶面积比例为：0-10.0%、10.1-20%、20.1-40%、40.1-70%、70.1-90%、90.1-100.0%。

6.根据权利要求2所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，步骤（5）中选择黑农51号作为母本，以步骤（4）中筛选出的抗性野生大豆资源为父本进行杂交育种，获得F0代杂交粒，收集杂交粒进行保藏。

7.根据权利要求2所述一种利用野生大豆选育抗/耐草甘膦新种质的方法，其特征在于，步骤（5）种间杂交创制新种质过程中，采用多功能授粉工具包和大豆授粉去雄器进行。