[发明专利]一株高产糖化酶的黑曲霉突变菌株及其工业发酵技术

权利要求书

1.一株高产糖化酶的黑曲霉突变株，其特征在于，所述菌株具体为黑曲霉(Aspergillus niger)GA-179，保藏编号CGMCC No.10788。

2.如权利要求1所述的一株高产糖化酶的黑曲霉突变株，其特征在于，所述菌株液体发酵平均产糖化酶酶活力为87000-90000U/mL。

3.利用权利要求1所述黑曲霉制备糖化酶的方法，包括如下步骤：

(1)种瓶制备：刮取GA-179试管斜面的菌苔接入察氏种瓶中，34℃，200rpm，发酵5d，发酵结束后将种子液收集到3L的无菌瓶中，得到种子罐的种瓶；

(2)种子罐培养：将种瓶接种到察氏种子罐中，34℃，180-300rpm，发酵48h；

(3)发酵罐培养：在无菌条件下，按照8％的接种量，将种子罐发酵液压入发酵罐，进行发酵罐培养，34℃，180-300rpm，发酵至60h后控制溶氧20％-30％，75h开始补料，发酵至菌体自溶严重，酶活无明显提高时放罐；

(4)提取与精制：发酵液加入100ppm聚丙烯酰胺和3％珍珠岩进行絮凝和板框压滤，然后进行超滤浓缩，最后加入防腐剂和保护剂配兑并用硅藻土过滤除菌，得到糖化酶成品酶制剂；

发酵罐培养所用的发酵培养基质量体积百分比组成如下：玉米粉10％-12％，豆饼粉2.5％-3％，麸皮1％-2％，氯化钙0.03％，硫酸铵1％-1.5％，玉米浆2％-3％，pH4.5；

补料所用的补料培养基质量体积百分比组成如下：玉米淀粉20％，玉米浆2％，硫酸铵0.5％，pH4.5。