[发明专利]一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法。

背景技术

积雪草，为为伞形科Centella asiatica(L．)Urb．的干燥全草。别名：十八缺、 崩大碗、马蹄草、雷公根、蚶壳草、铜钱草、落得打等。具有清热利湿，消肿解毒。治痧气腹痛，暑泻，痢疾，湿热黄疸，砂淋，血淋，吐、衄、咳血，目赤，喉肿，风疹，疥癣，疔痈肿毒，跌打损伤。积雪草中含积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草酸等多种三萜类化合物，其中积雪草苷和羟基积雪草苷为积雪草中主要活性成分。

目前，测定积雪草苷的方法有滴定分析法、薄层扫描法和反相HPLC-UV等方法。其中上述方法存在许多问题，如滴定法要把皂苷水解然后再测定其总三萜酸的含量，方法较繁。

发明内容

本发明的目的在于提供一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法。

为了解决上述问题，采取的技术方案是：

一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法，其特征在于，它是以 HPLC 指纹图谱进行测定的，包括以下操作步骤 ：

（1）标准品溶液的制备：精密称取积雪草苷对照品5mg，用甲醇-水（9:1）定容至10ml，备用。

（2）样品溶液制备：样品溶液制备：精密称取样品适量，加甲醇-水（9:1）超声溶解，稀释定容成积雪草苷含量约0.5mg/ml，用0.45 μm微孔 滤膜过滤，备用。

（3）取标准品溶液、样品溶液各20μL ，分别注入 HPLC 仪。

（4）色谱条件如下：

检测波长：206nm；

色谱柱：C18色谱柱（250*4.6mm，5μm）；

进样量：10μL；

流动相：以甲醇 - 水系统梯度洗脱，梯度条件如下 ：

时间甲醇水0min20%80%20min25%75%40min50%50%60min55%45%70min25%75%

所述的一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法，步骤 （4）中，检测柱温为 25℃，流速0.8ml/min。

所述的一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法，理论板数按积雪草苷峰面积计算应不低于5000。

所述的一种积雪草及其提取物中积雪草总苷含量的测定方法，总苷以羟基积雪草苷和积雪草苷的总量计。

附图说明：

图1为积雪草提取物标准图谱。图谱对应物质如下：