[发明专利]一种葵花籽粕绿原酸的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及绿原酸制备的技术领域。具体的说，本发明涉及葵花籽粕绿原酸的制备方法及应用的技术领域。

背景技术

绿原酸又名咖啡单宁酸、咖啡鞣酸，是由一分子奎尼酸与一分子咖啡酸脱水缩合而成的缩酚酸，分子式为C₁₆H₁₈O₉，熔点为208℃，相对分子质量为354.30，为白色或淡黄色针晶，且在110℃脱水转变为无水化合物，比旋光度[α]D＝35.2^。。绿原酸在水中的溶解度约为4％，溶解度与水温呈正相关关系，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等强极性有机溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于苯、氯仿、乙醚等弱极性有机溶剂，绿原酸类物质是许多中药材的主要功效成分，也是多种成品药质量控制的重要指标之一。

葵花籽一般含绿原酸1.1％-4.5％。但葵花籽粕中的蛋白质容易被绿原酸氧化，降低葵花籽粕蛋白的营养价值。目前，葵花榨油厂一般把榨油后的饼粕作为饲料，这样严重浪费了自然资源。如果首先从葵花籽粕中提取绿原酸，然后进一步提取优质的蛋白质，这样就可以大幅度地提高葵花籽粕的利用率，对葵花籽粕实现多次经济增值。

经检索，目前有很多关于利用葵花籽粕做为饲料的应用研究，而关于提取葵花籽粕中绿原酸、利用超声辅助离子提取法和NKA-2大孔树脂-溶致结晶联用技术提取葵花籽粕中的绿原酸和纯化葵花籽粕绿原酸的研究较少。因此，探索和研究提取率高、纯度高、制备的葵花籽粕绿原酸具有较强活性的制备方法具有重要的意义。

发明内容

针对目前未见利用超声辅助离子提取法和NKA-2大孔树脂-溶致结晶联用技术提取葵花籽粕中的绿原酸和纯化葵花籽粕绿原酸的研究现状，本发明旨在于提供一种葵花籽粕绿原酸的制备方法及其应用，目的在于利用超声辅助离子提取法和NKA-2大孔树脂-溶致结晶联用技术提取葵花籽粕中的绿原酸和纯化葵花籽粕绿原酸。本发明制备的葵花籽粕绿原酸为淡黄色，提取率为5.72％，绿原酸纯度为67.56％，同时，本发明制备的葵花籽粕绿原酸具有较强的总抗氧化活性、清除·OH自由基和DPPH·自由基的能力；对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉均有抑制作用；将本发明制备的葵花籽粕绿原酸添加到面包中，可以使面包的贮藏期延长33.3％。

本发明通过以下技术方案实现的。

本发明以葵花籽粕为原料，采用超声辅助离子提取法提取葵花籽粕绿原酸，利用NKA-2大孔树脂-溶致结晶联用技术对提取获得的葵花籽粕绿原酸进行纯化，其中，超声辅助离子液体提取法的条件为：功率220W，温度41℃，[Bmim]BF4与水的体积比1：4，料液比为1:15，提取时间34min；NKA-2大孔树脂-溶致结晶联用技术的工艺条件为上样液浓度为1.06-1.59mg/mL、上样流速为2BV/h、上样量为3BV，用3BV 60％乙醇以2BV/h进行洗脱，结晶时，葵花籽粕绿原酸的pH＝2.0，萃取时间25min，萃取四次，真空冷冻干燥获得葵花籽粕绿原酸。同时，本发明制备的葵花籽粕绿原酸具有较强的总抗氧化活性、清除·OH自由基和DPPH·自由基的能力；对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉均有抑制作用；将本发明制备的葵花籽粕绿原酸添加到面包中，可以使面包的贮藏期延长33.3％。

本发明具体提供一种葵花籽粕绿原酸的制备方法及其应用，具体的制备方法步骤如下：

(1)葵花籽粕的预处理：挑选无霉变的葵花籽粕，脱脂，脱脂试剂为石油醚，脱脂温度为40℃，时间为12h；低温烘干，粉碎，过100目筛。

(2)超声处理：称取步骤(1)制备的葵花籽粕于萃取容器中，按照料液比为1:15的比例添加混合萃取溶剂，进行超声处理，其中超声功率为220W、温度41℃、时间34min。

所述的混合萃取溶剂：按照[Bmim]BF₄与水的体积比为1:4的比例混合，制备获得。

(3)离心：对步骤(2)制备的混合溶液进行离心处理，其中离心时间为10分钟，转速为8000r/min，取上清液，上清液在30℃的条件下进行浓缩，浓缩液在-50℃的条件进行冷冻干燥。

(4)纯化：将步骤(3)冷冻干燥后的绿原酸，制备为浓度为1.06mg/mL-1.59mg/mL的绿原酸溶液，上NKA-2大孔树脂柱，上样量的流速为2BV/h，上样量为3BV；用3BV的60％的乙醇以2BV/h的流速进行洗脱，洗脱液浓缩，得到葵花籽粕浓缩液，冷冻干燥得到绿原酸Ⅰ。