[发明专利]一种烟草青枯病综合防控方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种烟草青枯病综合防控方法，属于烟草青枯病防控技术领域。

背景技术

烟草青枯病是由青枯劳尔氏菌（Ralstoniasolanacearum）引起的一种以土壤传播为主的毁灭性细菌性烟草病害。烟草青枯病是影响贵州烟叶生产的最主要的细菌性病害之一。近年来，随着科技进步和人们环保意识的加强，生物防控方法逐渐引起了人们的重视，目前对青枯病病原菌的防控都停留在实验室中拮抗菌对病原菌的平板拮抗作用，直接应用于温室试验或田间试验的防控效果甚微，Anuratha等将平板筛选得到的荧光假单胞杆菌直接用于田间试验，其对番茄青枯病的防控率仅为36%左右。

拮抗菌单独施入土壤后不易定殖，提高拮抗菌在土壤根际的定殖成为生物防控的研究重点，目前采用施用拮抗菌结合有机肥或经过2次发酵制成生物有机肥病施调节土壤微生态、改善土壤微生物多样性、抑制病原菌的生长或提高植物自身抗性，从而抑制青枯病的发生。由于环境的复杂性及单一防控措施的局限性对病害发病严重的田块采用单项防控措施的效果并不理想，因此探索一种有效的综合防控青枯病的措施意义重大。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：发明人针对烟草青枯病发病严重的烟田进行三年长期定位修复，并通过研究土壤中病原菌与拮抗菌的消长关系及土壤微生物区系变化特征，提出了一种烟草青枯病综合防控方法，该方法将各种防控手段有效协同，能够解决现有单一措施对青枯病防控效果有限的问题。

本发明的技术方案：一种烟草青枯病综合防控方法，在栽种烟草前对土壤进行以下处理：1）土壤预处理：在上一年烟草收获后的10～11月份内，用生石灰90～100kg/亩，均匀撒在土壤表层；2）在土壤上播种绿肥作物，并在来年2-3月份作压青处理；3）土壤再处理：压青后用生石灰90～100kg/亩再次均匀撒在土壤表层；4）对土壤进行深翻；5）施加生物有机肥。

所述生物有机肥的制备方法为：将拮抗菌L-25接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基，三角瓶装液量为1/5，30℃、170r/m振荡48h，然后将发酵液6000×g离心10min，收集菌体按5%接种量接种于灭菌后的有机肥载体，调节有机肥含水量为40%，发酵5～6d，定期翻抛得L-25二次发酵的生物有机肥。

所述生物有机肥的制备方法为：将L-9接种于高氏一号液体培养基，三角瓶装液量为1/5，30℃、170r/m振荡48h，然后将发酵液6000×g离心10min，收集菌体按5%接种量接种于灭菌后的有机肥载体，调节有机肥含水量为40%，发酵5～6d，定期翻抛得L-9二次发酵的生物有机肥。本发明中有机肥与拮抗菌相结合制成微生物有机肥后施用，对烟草青枯病害的防控具有很好的效果。

所述生物有机肥为将前述L-25与L-9分别二次发酵的生物有机肥以质量比1:1混合后制成的生物有机肥。本发明中L-25具有成本低及防控效果差的特点，L-9具有成本高及防控效果好的特点，将二者结合起来，能起到综合防控效果及兼顾生产成本的作用。

所述有机肥载体为菜粕酶解的氨基酸有机肥与牛粪以质量比1:1混合，含有机质33.8%、氨基酸4.3%、N4.20%、P₂O₅2.26%、K₂O1.08%。

所述绿肥植物为晚熟油菜、小麦或三叶草。该类绿肥植物易于种植，且成本较低。

所述L-25为采用前期自健康烟草根际土壤分离筛选到的拮抗菌，所述L-9为采用前期自健康烟草根际土壤分离筛选到的拮抗菌。本发明中采用的拮抗微生物均从烟草根际土筛选获得，在烟草根际上具有很强的定殖能力；同时拮抗菌以有机肥为载体，经过二次固体发酵后施入土壤中，在土壤中的定殖能力更强，对病原菌起到较好的抑制作用，进而推迟烟草植株发病时间和显著降低青枯病发病指数。

本发明的有益效果：在本发明中用生石灰进行预处理和再处理以调节土壤pH，能够抑制青枯劳尔氏菌的生长繁殖；播种绿肥作物，能够培养其它类型的微生物，以挤占青枯劳尔氏菌的生存资源；对土壤进行深翻和施用生物有机肥，也能够进一步的抑制青枯劳尔氏菌的繁殖。本发明能通过前述措施可有效改善土壤微生物平衡，恢复被破坏的土壤生态系统，从而建立起复杂而健康的土壤微生物体系。拮抗菌在有机肥协助下形成“基质–菌群”生态系统，更有利于调节土壤微生态环境，可改变根际土壤微生物生态特征和物理化学特征，从而起到防病、抑病的作用。