[发明专利]一种石蒜离体快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物药材石蒜种子繁育扩种方法，该技术直接应用于生物药材繁育扩种，尤其涉及一种石蒜离体快速繁殖方法。

背景技术

石蒜是东亚常见的园林观赏植物，冬赏其叶，秋赏其花。是优良宿根草本花卉，园林中常用作背阴处绿化或林下地被花卉，花境丛植或山石间自然式栽植。因其开花时光叶，所以应与其他较耐明的草本植物搭配为好。可作花坛或花径材料，亦是美丽的切花。

石蒜鳞片是最为常用的快速繁殖的组培材料。研究表明，石蒜叶片和子房也可以再生形成小苗。以鳞茎为外植体进行再生虽然取材相对较方便，但由于鳞茎带菌严重，常常导致消毒不彻底，培养过程中反复污染现象非常严重，增大工作量，而且以鳞片为外植体再生效率并不十分理想。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供，提供一种石蒜离体快速繁殖方法。本发明的方法再生效率增高，污染率降低，通过调节培养基条件提高了诱导率，缩短了再生周期，此再生体系适用于多个石蒜品种。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种石蒜离体快速繁殖方法，包括如下步骤：

1)取露地种植的石蒜种球，消毒，将母球附近附生的子球取下种植1～2个月；

2)将步骤1)得到的种球消毒后去掉外麟皮，剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

3)将步骤2)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；

4)待步骤3)得到的不定芽伸长产生侧芽时，进行切分；

5)将步骤4)中切分好的单一植茎放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得石蒜幼苗。

本发明的有益效果是：本发明的方法利用石蒜的幼嫩小芽为外植体，直接再生大量不定芽，继而得到再生苗，与使用鳞片作为外植体进行组织培养相比，本发明的方法再生效率增高，出芽率为90％以上，污染率降低，培养过程中不会出现反复污染的情况，通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述MS固体培养基为MS+BA1.8～2.2mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，所述芽伸长培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，所述芽伸长培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.8～1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28～32g/L，琼脂4～6g/L。

进一步，步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

进一步，步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

进一步，步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例一

一种石蒜离体快速繁殖方法，包括如下步骤：

1)取露地种植的石蒜种球，消毒，将母球附近附生的子球取下种植1个月；

2)将步骤1)得到的种球消毒后去掉外麟皮，剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；

3)将步骤2)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；

4)待步骤3)得到的不定芽伸长产生侧芽时，进行切分；

5)将步骤4)中切分好的单一植茎放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得石蒜幼苗。

所述MS固体培养基为MS+BA1.8mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L，琼脂4g/L。

所述芽伸长培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L，琼脂4g/L。

所述芽伸长培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖28g/L，琼脂4g/L。

步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为：温度25℃，光照：16光期/8暗期。

实施例二

一种石蒜离体快速繁殖方法，包括如下步骤：