[发明专利]EIN2蛋白在抑制基因表达中的应用有效
| 申请号： | 201510683874.6 | 申请日： | 2015-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN105175521B | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 郭红卫;李文阳;马梦迪;王益川 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C07K14/415 | 分类号： | C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
| 代理公司： | 北京东方汇众知识产权代理事务所(普通合伙) 11296 | 代理人： | 张淑贤 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ein2 蛋白 抑制 基因 表达 中的 应用 | ||
1.EIN2蛋白在抑制带有EBF1 3’UTR的报告基因的表达中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述EIN2蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述EIN2蛋白在细胞质中抑制EBF1mRNA到蛋白质的翻译过程中的应用。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述EIN2蛋白在获得乙烯超敏感型转基因拟南芥中的应用。
5.一种检测EIN2蛋白在抑制基因表达中的功能的方法，其特征在于，包括制备重组基因M1C与M1F，其中M1F包括依次连接的MYC标签编码序列、EBF1编码序列、EBF1mRNA的3’UTR、重组基因所转录出的成熟mRNA的PolyA；M1C包括依次连接的MYC标签编码序列、EBF1编码序列、重组基因所转录出的成熟mRNA的PolyA；分别转入野生型拟南芥Col-0、ein2-5突变体以及EIN2过表达的EIN2ox植株中，进而检测转基因株系体内MYC-EBF1蛋白的水平。
6.根据权利要求5所述的检测EIN2蛋白在抑制基因表达中的功能的方法，其特征在于，包括制备重组基因35S::EIN2-mRFP，所述重组基因为将EIN2基因与红色荧光蛋白mRFP的编码序列融合，然后将重组基因转入乙烯完全不敏感突变体ein2-5中获得转基因株系35S::EIN2-mRFP/ein2-5，筛选获得对乙烯反应与野生型拟南芥Col-0一致的35S::EIN2-mRFP/ein2-5株系，对该株系施加外源乙烯，同时对融合蛋白EIN2-mRFP进行亚细胞定位。
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