[发明专利]鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的成套试剂与印度南瓜蔓长分子标记有效
申请号: | 201510689579.1 | 申请日: | 2015-10-21 |
公开(公告)号: | CN106609298B | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 张国裕;李海真;张帆;贾长才;姜立纲 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 10009*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 辅助 印度 南瓜 性状 成套 试剂 分子 标记 | ||
1.鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的成套引物组,由名称分别为A1和A2的引物对组成;
所述A1由名称为P1和P2的单链DNA组成,所述P1为与SEQ ID No.1的第93位上游特异结合的单链DNA,所述P2为与SEQ ID No.1的第1341位下游特异结合的单链DNA;所述A2由名称为P3的单链DNA和所述P2组成,所述P3为与SEQ ID No.1的第93-1341位间特异结合的单链DNA。
2.根据权利要求1所述的成套引物组,其特征在于:所述P1为SEQ ID No.1的第1-25位所示的单链DNA,所述P2为与SEQ ID No.1的第1429-1452位反向互补的单链DNA,所述P3为SEQ ID No.1的第307-328位所示的单链DNA。
3.鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的引物对,为权利要求1或2所述A1或所述A2。
4.鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的系统,由X1和X2组成;所述X1为权利要求1或2所述成套引物组、所述A1或所述A2,所述X2为进行PCR扩增所需的试剂和/或仪器。
5.鉴定或辅助鉴定印度南瓜基因型的方法,所述基因型为RR基因型、RS基因型和SS基因型,所述方法为如下Ⅰ或Ⅱ:
Ⅰ、包括如下K1)和K2):
K1)以待测印度南瓜基因组DNA为模板,采用权利要求1或2所述成套引物组进行PCR扩增得到PCR产物;
K2)检测步骤K1)得到的PCR产物,根据所述PCR产物确定印度南瓜基因型:
所述PCR产物的两条DNA片段均含有SEQ ID No.1的第93-1341位的所示的DNA片段,所述待测印度南瓜的基因型为RR基因型;所述PCR产物的两条DNA片段,仅有一条含有SEQ IDNo.1的第93-1341位所示的DNA片段,所述待测印度南瓜的基因型为RS基因型;所述PCR产物的两条DNA片段,均不含SEQ ID No.1的第93-1341位的DNA,所述待测印度南瓜的基因型为SS基因型;
Ⅱ、包括如下L1)和L2):
L1)采用权利要求2所述成套引物组进行PCR扩增得到PCR产物,所述PCR产物为1452bp和1146bp的DNA片段,所述待测印度南瓜的基因型为RR基因型;采用权利要求2所述成套引物组进行PCR扩增得到PCR产物,所述PCR产物为203bp和1146bp的DNA片段,所述待测印度南瓜的基因型为RS基因型;采用权利要求2所述A1扩增时,所述PCR产物为203bp的DNA片段,所述待测印度南瓜的基因型为SS基因型;
L2)以待测印度南瓜基因组DNA为模板,采用权利要求2所述成套引物组进行PCR扩增得到PCR产物; 所述PCR产物为SEQ ID No.1所示的DNA片段和SEQ ID No.1的第307-1452位所示的DNA片段的所述待测印度南瓜的基因型为RR基因型;如果所述PCR产物为SEQ ID No.2所示的DNA片段和SEQ ID No.1的第307-1452位所示的DNA片段的所述待测印度南瓜的基因型为RS基因型;如果所述PCR产物为SEQ ID No.2所示的DNA片段的所述待测印度南瓜的基因型为SS基因型。
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