[发明专利]一种脱细胞基质凝胶的制备方法及其脱细胞基质凝胶

权利要求书

1.一种脱细胞基质凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取新鲜猪周围组织，剪去表面的脂肪组织和部分外膜，置蒸馏水中震荡、漂洗一定时间后，通过2次循环萃取脱去组织中的细胞并洗去会造成免疫反应的物质，获得脱细胞基质；

(2)将脱细胞基质进行冷冻干燥，再用粉碎机把脱细胞基质磨成粉末，获得脱细胞基质粉末；

(3)把适量的胃蛋白酶、脱细胞基质粉末加入0.01mol/LHcl溶液中，在25℃室温下保持恒定搅拌6h-48h，超速离心除去未消化的大颗粒物；取上清液低温储存待用，获得脱细胞基质预凝胶溶液；

(4)将低温储存的脱细胞基质预凝胶溶液取出后加入适量的0.1mol/L氢氧化钠调节脱细胞基质预凝胶溶液至ph＝7.4并加入1/9脱细胞基质预凝胶溶液体积的10×PBS，并用pH值为7.4的PBS调整至溶液所需的体积和浓度，再放置于37℃下静置数分钟即可形成凝胶；所述低温储存为-40℃—6℃。

所述2次循环萃取具体过程为：萃取时将组织放入3％的Triton-X100水溶液中振荡12h，然后在蒸馏水中漂洗3次，再放入4％的脱氧胆酸钠水溶液中室温下震荡24h，最后在蒸馏水中漂洗3次，如此一个循环为萃取1次，共进行两次循环萃取。

2.根据权利要求1所述的脱细胞基质凝胶的制备方法，其特征在于，所述脱细胞基质粉末直径为200μm。

3.根据权利要求1所述的脱细胞基质凝胶的制备方法，其特征在于，所述的脱细胞基质凝胶可以自发的形成互穿纳米纤维网络结构。

4.一种脱细胞基质凝胶，其特征在于，由权利要求1所述的制备方法制得，包括如下质量百分比的组分：脱细胞基质含量0.01～10％、交联剂0.1％～20％、消化液余量，所述消化液为含有胃蛋白酶的盐酸溶液。

5.根据权利要求4所述的脱细胞基质凝胶，其特征在于，其具有微观纳米纤维网络结构。