[发明专利]人肿瘤坏死因子受体-Fc融合基因及其产物蛋白有效
申请号: | 201510691152.5 | 申请日: | 2010-09-01 |
公开(公告)号: | CN105200073B | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 赵志全;赵丽丽 | 申请(专利权)人: | 山东新时代药业有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C07K19/00 |
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地址: | 273400 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 肿瘤 坏死 因子 受体 fc 融合 基因 及其 产物 蛋白 | ||
1. 一种提高重组人TNFR75-Fc融合基因表达量的方法,其特征在于,所述重组人TNFR75-Fc融合基因为SEQ ID NO:3所述的碱基序列;所述重组人TNFR75-Fc融合基因由SEQID NO:1所述的序列的人TNFR75基因和含有SEQ ID NO:2所述的序列的人Ig抗体Fc基因融合而制得;融合基因构建过程中,TNFR75的3’端引物中引入了18个碱基与人IgG1Fc基因片段5’端的18 个碱基互补;利用表达载体pCI-neo改造得到的pCI-gs载体的EcoRⅠ单酶切位点,插入经DNA序列测定结果正确的rhTNFR-Fc基因片段,得到pCI-gs-TNFR75-Fc;表达用哺乳动物细胞选自CHO细胞、NSO细胞;在进行高效表达细胞株筛选过程中,最终将MSX浓度提高到500μm。
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