[发明专利]膀胱癌筛选检测试剂盒

说明书

技术领域

本申请涉及膀胱癌检测治疗领域。

背景技术

一些科学研究显示，大于两百核苷酸的长链非编码RNA(lncRNA)参与了各种人类疾病尤其是肿瘤的进展。PVT1是长链非编码家族中的明星成员且在前列腺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌等癌中起着重要的作用，但是该基因与膀胱癌的联系仍不清晰。四环素诱导系统是当今使用最广泛的调控系统，且是一种在医学合成生物学兴起的时代发挥巨大作用的工具。该系统可以被用来控制基因的表达，为我们提供了治疗膀胱癌的新思路。

发明内容

本发明提供一种新的膀胱癌筛选检测试剂盒。

本发明提供一种膀胱癌筛选检测试剂盒，能够特异性识别PVT1基因。

PVT1在膀胱癌细胞中高表达，通过检测该基因，可以实现对膀胱癌的筛选检测。

一种膀胱癌细胞筛选检测试剂盒，能够特异性识别PVT1基因，所述膀胱癌细胞是T24和5637。

一种四环素诱导的PVT1shRNA在制备治疗膀胱癌的药物中的应用。

一种四环素诱导的PVT1shRNA在制备抑制膀胱癌细胞中PVT1基因表达的试剂中的应用。膀胱癌细胞如T24和5637。

一种四环素诱导的PVT1shRNA在制备促进膀胱癌细胞凋亡的药物中的应用。

一种四环素诱导的PVT1shRNA在膀胱癌细胞中调控PVT1基因表达的应用。该shRNA通常可以敲低PVT1在膀胱癌细胞中的表达。

一种四环素诱导的PVT1shRNA，其核苷酸序列如SEQNO:1所示。

本发明的有益效果是：PVT1在膀胱癌细胞中高表达，通过检测该基因，可以实现对膀胱癌的初期筛查；四环素诱导的PVT1shRNA可以有效敲低PVT1的表达，抑制膀胱癌细胞增殖，促进膀胱癌细胞凋亡，从而为膀胱癌的诊断治疗提供了可能性。

附图说明

图1是显示PVT1在膀胱癌组织及细胞中高表达的结果图；其中，A部分表示使用定量PCR方法检测膀胱癌组织中PVT1的相对集中度；B部分表示与癌旁组织相比，PVT1在癌组织中显著性高表达(P<0.01)；C、D部分表示与SV-HUC-1细胞系对比，PVT1在T24(C部分)及5637(D部分)均显著性高表达(两个p均小于0.01)；数据用均值±标准差显示(*P<0.05，**P<0.01)；

图2是显示转染siRNA或者四环素诱导shRNA后PVT1表达水平显著性下降的结果图；其中，A、B部分表示与si-NC组对比，PVT1表达水平在si-PVT1组中表达水平显著性下降(T24和5637均P<0.01)；C、D部分表示与对照组对比，加入不同浓度强力霉素后四环素诱导组的PVT1表达水平下降；1μg/ml强力霉素能够最大程度的抑制PVT1的表达水平(T24、5637均P<0.01)；数据用均值±标准差显示(*P<0.05,**P<0.01)；其中，对于C、D部分，对应每个浓度，从左到右的四个方柱分别表示PVT1shPVT1+DOX、NCshRNA+DOX、PVT1shRNA-DOX和NCshRNA-DOX；

图3是显示转染siRNA或者四环素诱导质粒后、细胞增殖被抑制的结果图；其中，CCK8方法用于检测细胞增殖；A、B部分中，与si-NC组对比，在si-PVT1组中，T24细胞(A部分)及5637细胞(B部分)的增殖被显著性抑制(P<0.01)；C、D部分中，与对照组相比，在加入1ug/ml强力霉素诱导的shRNA组中，T24细胞(C部分)及5637细胞(D部分)的增殖被显著地抑制(P<0.01)；数据用均值±标准差显示(*P<0.05，**P<0.01)；其中，对于A、B部分，实线表示si-NC，虚线表示si-PVT1；对于C、D部分，折线G、H、I和J分别表示NC-DOX、NC+DOX、PVT1shRNA-DOX和PVT1shRNA+DOX；