[发明专利]一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液及其制备方法。

背景技术

新城疫和禽流感是当今全球范围内最流行的家禽传染病，也是我国所有鸡病中危害最大的两种疾病。二联疫苗的制备，可以一针防治两种传染病，同时可以解决使用多种疫苗分次免疫，造成的鸡群的其它的不良反应，简化免疫程序，降低投入的成本。当前国内生产的新城疫、禽流感二联灭活疫苗基本都是采用鸡胚接种病毒后进行增殖，收获尿囊液制备而成。传统的二联疫苗均由单一疫苗分别生产后混合在一起制成二联疫苗，该工艺费时费力，生产成本较高。同胚培养是近年来兽用生物制品行业提出的生产工艺，即将两种病毒以合适的比例混合后同时接种到鸡胚中进行增殖，该工艺减少了生产工艺环节，缩短的生产周期，减少人力物力投入，大大降低了生产成本。但是截至到目前为止同胚培养的工艺仍存在缺陷，特别是鸡新城疫、禽流感的同胚培养，培养过程中由于病毒之间的互相干扰，两种病毒的含量均不稳定，批次间差异较大，困扰着该品种的生产，严重影响了后期疫苗的品质。

因此，研发一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液势在必行。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液及其制备方法的技术方案。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于所述的鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液每1000ml磷酸缓冲液中含有以下重量配比的组分：氨基酸组合2～4g、维生素组合3～6g、亚硒酸钠0～10mg和复方中药多糖20～50g；

所述的氨基酸组合包括天冬氨酸、脯氨酸和谷氨酰胺；

所述的维生素组合包括维生素B1、维生素B3和维生素B7；

所述的复方中药多糖由海藻、地肤子、桑叶、牵牛子和丹参提取得到。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于该稀释液的pH为7.0～7.2。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于所述的磷酸缓冲液由氯化钠6～10g，氯化钾0.05～0.5g，磷酸氢二钠1～1.2g，磷酸二氢钾0.05～0.5g，氯化钙0.05～0.2g，含6个结晶水的氯化镁0.05～0.2g溶于1000ml双蒸水中得到。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于所述的氨基酸组合中含有：天冬氨酸20～50%、脯氨酸20～40%和谷氨酰胺10～60%，优选为天冬氨酸30～40%、脯氨酸25～35%和谷氨酰胺30～40%。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于所述的维生素组合中含有：维生素B115～35%、维生素B320～50%和维生素B720～50%，优选为维生素B120～30%、维生素B330～40%和维生素B735～45%。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，其特征在于所述的复方中药多糖按以下步骤制得：

a、按海藻20～40份、地肤子5～20份、桑叶10～30份、牵牛子5～20份和丹参10～30份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀得到粗制中药多糖；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解，溶解后，按0.5%比例加入活性炭4℃吸附过夜，吸附后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

e、将d中上清液进行10倍浓缩，制得中药多糖浓缩液；

f、将e中中药多糖浓缩液进行真空冷冻干燥制得复合中药多糖冻干粉。

所述的一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液的制备方法，其特征在于通过以下步骤制得：

1）磷酸缓冲溶液的配制：按比例称取氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钙、含6个结晶水的氯化镁溶于双蒸水中，无菌条件下通过0.22μm滤膜，过滤除菌备用；

2）复方中药多糖的制备

a、按比例称取海藻、地肤子、桑叶、牵牛子和丹参，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；