[发明专利]葶苈子水提物在制备雌激素类药物中的应用

说明书

本发明公开了葶苈子水提物在制备雌激素类药物中的应用。本发明首先通过小鼠子宫增重实验筛选出葶苈子水提物具有雌激素样活性，接着用MCF‑7细胞增殖实验从体外再次证明葶苈子水提物具有雌激素样活性，然后通过MCF‑7细胞增殖拮抗实验发现葶苈子是通过经典的雌激素信号转导途径起作用的，最后运用重组DNA技术，对ERE调控的报告基因瞬时表达进行检测，从而初步探讨葶苈子发挥雌激素样作用的机制。本发明葶苈子水提物制备方法简单，重现性好，经多次试验，均取得了相同或相近似的结果，为植物雌激素的研究扩大药用资源，开辟了葶苈子药用新用途。

技术领域

本发明涉及雌激素类药物领域，具体涉及一种葶苈子水提物在制备雌激素类药物中的应用。

背景技术

葶苈子为十字花科植物播娘蒿Descurainia sophia(L)Webb.ex Prantl.(DSW)或独行菜Lepidium apetalum Willd.(LAW)的干燥成熟种子。夏季果实成熟时采割植株，晒干，搓出种子，除去杂质。前者习称南葶苈子，后者习称北葶苈子。由于南葶苈子的药源较广，故本实验选用南葶苈子进行研究。葶苈子始载于《神农本草经》，列为下品，味辛、苦；性大寒；归肺、膀胱经。中医认为其能泻肺平喘，利水消肿；用于痰涎壅肺，咳喘痰多，胸胁胀满，不得平卧，胸腹水肿，小便不利等。现代药理研究表明，葶苈子水提物能明显改善心衰大鼠的钠水潴留，且具有显著的利尿作用。同时，有实验表明葶苈子具有抗氧化作用。葶苈子还可以调节高血脂症大鼠的血脂水平。但尚未见有葶苈子雌激素样活性方面的研究。

发明目的

本发明的目的是研究葶苈子水提物在制备雌激素类药物中的应用。

本发明的技术方案是：所述葶苈子水提物在制备雌激素类药物中的应用。

所述葶苈子水提物在增加性未成熟雌性小鼠的子宫系数中的应用。

所述葶苈子水提物对MCF-7细胞增殖的应用。

所述葶苈子水提物在体内、体外都有雌激素样活性，通过激活雌激素受体ERβ发挥雌激素样活性。

所述葶苈子水提物的制备方法为：葶苈子以10倍量的水煎煮3次，每次1h，第一次煎煮时，先侵泡30分钟，合并3次水煎液，减压浓缩干燥，得到葶苈子水提物。

本发明的有益效果是：本发明运用体内小鼠子宫增重实验和体外MCF-7细胞增殖实验筛选葶苈子水提物的雌激素样活性；采用MCF-7细胞增殖拮抗实验和ERE调控的报告基因Luc瞬时表达检测技术确定葶苈子水提物雌激素样活性的作用机制。葶苈子水提物可以显著增加性未成熟雌性小鼠的子宫系数，与正常组相比且有显著性差异(P<0.01)；MCF-7细胞增殖实验表明，葶苈子水提物的多个浓度都有明显的促增殖作用(P<0.01)，且该促增殖作用可以被雌激素受体阻断剂ICI182,780抑制。ERE调控的报告基因瞬时表达结果显示，由ERα介导时，葶苈子水提物各个浓度标准化后的荧光素酶活性与正常组相比没有显著差异；通过ERβ介导时，0.05mg/ml的葶苈子水提物标准化后的荧光素酶活性显著高于正常组(P<0.01)。葶苈子水提物在体内、体外都有明显的雌激素样活性，且主要通过激活雌激素受体ERβ发挥雌激素样活性。

本发明首先通过小鼠子宫增重实验筛选出葶苈子水提物具有雌激素样活性，接着用MCF-7细胞增殖实验从体外再次证明葶苈子水提物具有雌激素样活性，然后通过MCF-7细胞增殖拮抗实验发现葶苈子是通过经典的雌激素信号转导途径起作用的，最后运用重组DNA技术，对ERE调控的报告基因瞬时表达进行检测，从而初步探讨葶苈子发挥雌激素样作用的机制。

本发明葶苈子水提物制备方法简单，重现性好，经多次试验，均取得了相同或相近似的结果，为植物雌激素的研究扩大药用资源，开辟了葶苈子药用新用途。

附图说明

图1为葶苈子水提物对性未成熟小鼠子宫系数的影响；