[发明专利]定量检测全血中肌钙蛋白I的磁微粒化学发光微流控芯片在审
申请号: | 201510696728.7 | 申请日: | 2015-10-26 |
公开(公告)号: | CN105435868A | 公开(公告)日: | 2016-03-30 |
发明(设计)人: | 王东;李泉 | 申请(专利权)人: | 深圳华迈兴微医疗科技有限公司 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518055 广东省深圳市南山区西丽茶光路*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定量 检测 全血中 肌钙蛋白 微粒 化学 发光 微流控 芯片 | ||
1.一种定量检测全血中肌钙蛋白I的磁微粒化学发光微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片包括顶板(1)结构和底板(2)结构,其中顶板(1)上的气泵(3)、加样口(4)、样本填充区(12)、标记抗体存储池(5)和样本混合区(13)依次连接;底板上的过滤区(6)、磁颗粒包被区(7)、清洗区(14)、检测区(8)、液体释放通道(16)依次连接;底板的检测区(8)分别与清洗液存储池(9)和发光基底液存储池(10)通过液体释放通道(16)连接;
所述标记抗体存储池(5)存储预封装酶或发光剂标记抗cTnI抗体,磁颗粒包被区(7)包被预封装磁颗粒标记抗cTnI抗体,清洗液存储池(9)和发光基底液存储池(10)存储预封装清洗液和发光基底液;所述微流控芯片测试流程中,用磁铁操控磁颗粒移动或聚集;所述标记抗体存储池、清洗液存储池和发光基底液存储池为液体密封池,可通过外力挤压而局部破裂,释放液体;所述过滤区包含滤血膜,所述顶板(1)与底板(2)用胶带(19和20)密封。
2.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于发光基底液保质期少于1年时应分开,用发光基底液存储池A(23)和发光基底液存储池B(24)替代发光基底液存储池(10),所述发光基底液存储池A(23)和发光基底液存储池B(24)通过预混合通道(25)连接。
3.如权利要求1所述的芯片,其特征在于,所述磁颗粒标记抗cTnI抗体使用的磁颗粒尺寸为0.1~10μm;与磁珠匹配的磁铁磁感应强度为500~30000高斯。
4.如权利要求3所述的芯片,其特征在于,所述磁颗粒标记抗cTnI抗体使用的磁颗粒尺寸为0.5~3μm,与磁珠匹配的磁铁磁感应强度为1000~8000高斯。
5.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述酶或发光剂标记cTnI抗体溶液、磁颗粒标记cTnI抗体溶液和清洗液均包含缓冲液、蛋白质、表面活性剂和防腐剂,且发光剂标记cTnI抗体溶液还包含甘油,磁颗粒标记cTnI抗体溶液还包含糖类。
6.如权利要求1或5所述的微流控芯片,其特征在于,所述酶标记cTnI抗体溶液包含牛血清白蛋白(BSA)、吐温-20和Proclin300的硼酸缓冲液;磁颗粒标记cTnI抗体溶液包含BSA、葡萄糖、吐温-20和Proclin300的硼酸缓冲液;所述清洗液包含BSA、吐温-20和Proclin300的硼酸缓冲液。
7.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述发光剂标记cTnI抗体溶液包含BSA、甘油、吐温-20、曲拉通X-100和叠氮钠的磷酸盐缓冲液;所述磁颗粒标记cTnI抗体溶液包含BSA、酪蛋白、蔗糖、吐温-20、曲拉通X-100和叠氮钠的磷酸盐缓冲液;所述清洗液包含BSA、吐温20、曲拉通X-100、聚乙二醇和叠氮钠的磷酸盐缓冲液。
8.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述发光基底液包含与酶对应的底物及发光增强液,可合并后注入发光基底液存储池(10),或分别注入发光基底液存储池A(23)和发光基底液存储池B(24)。
9.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述发光基底液包含发光剂对应的双氧水溶液和碱性溶液,可合并后注入发光基底液存储池(10),或分别注入发光基底液存储池A(23)和发光基底液存储池B(24)。
10.一种心肌肌钙蛋白I定量检测的磁微粒化学发光微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片的测试流程包括:
步骤1)将样本滴入加样口后,盖上盖子,微流控芯片放入配套仪器中,酶或发光剂标记抗体释放后,气泵使样本和标记抗体混合均匀,然后注入底板过滤区,所述配套仪器为小型便携设备,包含挤压气泵和存储池,磁铁移动,发光检测系统等功能;
步骤2)样本经过滤区后,到达包被区,溶解磁标抗体,充分反应后磁铁收集磁颗粒,存储池释放清洗液,将磁颗粒清洗后,移至检测区,释放发光基底液,仪器检测系统检测发光信号强度,进而实现cTnI的定量检测。
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