[发明专利]抗人PCSK9单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种利用噬菌体抗体库技术筛选并利用基因工程方法制备的新型抗人PCSK9的单克隆抗体或其片段，其特征在于对人PCSK9具有高亲和力。本发明抗体可以是全长抗体、基本上完整的抗体、Fab片段、F(ab')₂片段或单链Fv片段。该单克隆抗体或其片段用于治疗由人PCSK9介导的疾病中的用途，所述的疾病包括但不局限于原发性高胆固醇血症、混合型高脂血症和家族性高胆固醇血症。

说明书

技术领域

本发明为基因工程抗体药物领域，特别是抗人PCSK9的单克隆抗体领域。本发明涉及人源性功能性抗人PCSK9单克隆抗体，以及这类抗体在治疗人PCSK9介导的疾病中的用途。

背景技术

心血管疾病是目前我国首位的死亡原因，其中动脉粥样硬化引起的心脏病、脑卒中和外周动脉疾病是导致死亡的主要原因，而低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高是动脉粥样硬化性心血管疾病最大的危险因素。他汀类药物是目前降低LDL-C最有效的药物，但是仍有部分患者的血脂水平未能达标，以及有些患者不能耐受他汀类药物。因此，需要寻找他汀以外的强效降胆固醇药物，以降低动脉粥样硬化性心血管疾病的风险。

前蛋白枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin kexin 9,PCSK9)，又称为神经凋亡调节转化酶1(neural apoptosis-regulated convertase 1,NARC-1)。PCSK9蛋白主要在肝脏中合成和分泌，PCSK9蛋白进入血液循环后，在肝脏与低密度脂蛋白受体(the low-density lipoprotein receptor,LDLR)结合，介导LDLR降解，从而降低肝脏对LDL-C的清除能力，升高血浆LDL-C水平。PCSK9基因敲除的小鼠表现出血浆胆固醇水平大约降低50％，而且使他汀类药物降低血浆胆固醇的灵敏度变高(Rashid S,et al2005,Proc Nath Acad Sci 102:5374-5379)。

抗PCSK9单克隆抗体可有效阻止PCSK9与LDL-R结合，从而发挥强效降胆固醇的作用，可用于他汀治疗未达标或他汀不耐受的高胆固醇血症的患者。

目前安进研发的PCSK9抑制剂Repatha(Evolocumab)和赛诺菲/再生元研发的PCSK9抑制剂Praluent(Alirocumab)都已经获得欧洲和美国FDA的批准上市，用于治疗原发性高胆固醇血症、混合型高脂血症和家族性高胆固醇血症。但是本领域仍然需要更多适于治疗患者的改善的抗PCSK9抗体。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型抗人PCSK9的单克隆抗体或其片段。由本发明涉及的抗体基因可变区的序列，可构建全长的抗体分子作为药物用于临床上由人PCSK9介导的疾病使用。这些适应症包括但不局限于下列：原发性高胆固醇血症、混合型高脂血症和家族性高胆固醇血症。

本发明从先前构建的大容量天然人源噬菌体抗体库(抗人IL-17单克隆抗体，专利申请号201510097117.0)中筛选并优化得到了全人源抗PCSK9单克隆抗体。

本发明的抗体为全人源的单克隆抗体，拮抗至少一种与PCSK9或其部分相关的体外或体内生物活性。

在一个实施例中，本发明抗体的特征在于能够有效抑制PCSK9结合重组人LDLR胞外区EGF-AB结构域。

在一个实施例中，本发明抗体的特征在于对人PCSK9具有强结合亲和力，亲和力优于(H7B12-IgG4)或与安进公司的同类抗体Evolocumab以及赛诺菲公司的同类抗体Alirocumab相似。