[发明专利]一种植物NIA1基因在提高银杏黄酮和内酯含量中的应用在审
申请号: | 201510698798.6 | 申请日: | 2015-10-23 |
公开(公告)号: | CN105368844A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 徐茂军;蒋智芳;杨燕君;许名峰;叶昱;郑耀奇;邱蓉蓉 | 申请(专利权)人: | 杭州师范大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/84;C12N5/10 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310036 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 nia1 基因 提高 银杏 黄酮 内酯 含量 中的 应用 | ||
1.一种植物NIA1基因在提高银杏黄酮和内酯含量中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述植物NIA1基因来源于拟南芥、烟草 或番茄。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述植物NIA1基因核苷酸序列为SEQID NO.1所示。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的应用是构建含植物NIA1基因的重 组载体,然后将重组载体导入农杆菌,获得含植物NIA1基因的重组基因工程菌,然后用 重组基因工程菌菌液侵染银杏组织,获得提高黄酮和内酯含量的转基因银杏细胞。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述的应用为:将拟南芥NIA1基因连接 到具有35S启动子的表达载体质粒中,构建含拟南芥NIA1基因重组载体,将重组载体导 入农杆菌EHA105,构建含拟南芥NIA1基因的重组基因工程菌,然后将含拟南芥NIA1 基因的重组基因工程菌经扩大培养获得的菌液侵染银杏愈伤组织,获得提高黄酮和内酯含 量的转基因银杏细胞。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述菌液的制备方法为:将含拟南芥NIA1 基因的重组基因工程菌接种在LB+50mg/LKm+50mg/LStr液体培养基中,28℃、200 r/min过夜培养,再以体积浓度10%的接种量转接入MS+50mg/LKm+50mg/LStr液体 培养基中,28℃、200r/min培养至OD600为0.2-0.8,5000r/min、4℃离心10min,收集 菌体,用MS培养基清洗3次后,用MS+乙酰丁香酮20mg/L培养基将菌体稀释10倍, 即为菌液。
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