[发明专利]猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法在审
| 申请号： | 201510702194.4 | 申请日： | 2015-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN105177166A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 颜其贵;罗露;任露;郝中香;曹三杰;文心田;伍锐;黄小波;廖红 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 裴娜 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪胞内劳森氏菌 lamp pcr 诊断 检测 方法 | ||
1.猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法，其特征在于，该方法通过在线软件，根据引物设计原理，针对胞内劳森氏菌AM18025.2.1基因序列设计了PCR和LAMP特异性引物，进行胞内劳森氏菌的LAMP与PCR检测。
2.如权利要求1所述的猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法，其特征在于，针对胞内劳森氏菌AM18025.2.1基因序列设计和筛选2对LAMP引物，分别是内引物FIP和BIP、外引物F3和B3；FIP由F2和F1c构成，F1c与F1互补；BIP由B2和B1c构成，B1c与B1互补；
特异性扩增引物包括以下引物：
3.如权利要求2所述的猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法，其特征在于，LAMP检测的反应体系为25μl：MgCl2(25mM)4μl，ThermoPolbuffer(10x)2.5μl，甜菜碱(8M)2.5μl，dNTP(10mM)1.5μl，BstDNA聚合酶(8U)1μl，内引物FIP(50μM)、BIP(50μM)各1μl，外引物F3(5μM)、B3(5μM)各0.5μl，质粒DNA模版1μl，加ddH2O补至25μl；反应温度为63℃，反应时间为50min，80℃终止反应10min；将反应产物经过1.5％琼脂糖凝胶电泳后，通过是否产生清晰的条带判断是否含有猪胞内劳森氏菌。
4.如权利要求2所述的猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法，其特征在于，PCR检测方法中，PCR反应条件为：94℃5min；93℃45s、57℃45s、72℃45s、35个循环；72℃10min终止反应。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于四川农业大学，未经四川农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510702194.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：发动机直驱风扇装置
- 下一篇：一种新型结构燃油泵润滑油管
