[发明专利]基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测法在审

专利信息
申请号: 201510703249.3 申请日: 2016-02-22
公开(公告)号: CN105483212A 公开(公告)日: 2016-04-13
发明(设计)人: 崔大祥;张晶璞 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 徐红银;郭国中
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 基于 agncs hpdna 探针 microrna sda 检测
【权利要求书】:

1.一种HpDNA,其特征在于,序列如SEQIDNO:1所示。

2.一种基于权利要求1所述HpDNA的AgNCs/HpDNA,其特征在于,所述 AgNCs/HpDNA是通过如下方法制备:

将AgNO3溶液、NaBH4溶液加入HpDNA中,震荡,静置,即得AgNCs/HpDNA。

3.根据权利要求2所述的AgNCs/HpDNA,其特征在于,所述HpDNA、AgNO3、 NaBH4的终摩尔浓度之比为1:17:17;

所述震荡的时间为45s~1min;

所述静置具体为暗环境中室温下放置18h。

4.一种根据权利要求2所述的AgNCs/HpDNA在检测胃癌血浆miRNA标志物 miR-19b-3p中的应用,所述miR-19b-3p的序列如SEQIDNO:2所示。

5.一种基于权利要求2所述AgNCs/HpDNA的胃癌血浆miRNA标志物miR-19b-3p SDA检测方法,其特征在于,所述检测方法包括:以所述AgNCs/HpDNAs为分子探针, 在含富G序列垂悬端的引物作用下进行SDA反应,借助富G序列杂交荧光增强效应, 分别在430nm及490nm波长激发下,实现miR-19b-3p检测。

6.根据权利要求5所述的胃癌血浆miRNA标志物miR-19b-3pSDA检测方法,其 特征在于,该引物序列如SEQIDNO:3。

7.根据权利要求5所述的胃癌血浆miRNA标志物miR-19b-3pSDA检测方法,其 特征在于,所述SDA反应的总体积为50μL,其中,

8.根据权利要求7所述的胃癌血浆miRNA标志物miR-19b-3pSDA检测方法,其 特征在于,所述缓冲液1×Nb2.1包括50mMNaAc、10mMTris-HAc、10mMMg(Ac)2和100μg/mLBSA,缓冲液pH7.9。

9.根据权利要求7所述的胃癌血浆miRNA标志物miR-19b-3pSDS检测方法,其 特征在于,所述SDA反应的反应条件为55℃环境中孵育55min。

10.一种根据权利要求5至9任一项所述的检测方法在单个碱基错配核酸序列检测 中的应用。

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