[发明专利]一种金银花的微量提取方法

权利要求书

1.一种天然产物的微量提取方法，用于提取金银花药材中的酚酸类成分，所述酚酸类有效成分为新绿原酸、绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸、4，5-二咖啡酰奎宁酸中的一种或两种以上，所述方法包括以下步骤：

(1)以一定的药材和吸附剂的质量比称取金银花药材粉末和吸附剂，加入研钵中研磨一定的时间。取1mL规格固相萃取小柱，底部加入筛板，用研磨好的固体填充小柱，将填料填实后顶部再加入筛板。将填好的小柱置于固相萃取仪上。取适量体积的洗脱液，注入小柱内，打开固相萃取仪的抽气泵，对小柱进行洗脱。底部用1.5mL规格离心管收集。洗脱结束后，将离心管内液体涡旋10s，后放入离心仪中离心。取上层清液装样，用超高效液相色谱仪(UPLC)采样分析，得到提取液中酚酸类有效成分的液相色谱图；

(2)以新绿原酸的对照品配制不同浓度的对照品溶液，按照提取液同样条件用超高效液相色谱仪检测，获得新绿原酸对照品的液相色谱图，以新绿原酸对照品的进样量为横坐标，以新绿原酸对照品溶液的液相色谱图中色谱峰的峰面积为纵坐标制作新绿原酸标准曲线，按同样方法制作绿原酸标准曲线、3，5-二咖啡酰奎宁酸标准曲线、4，5-二咖啡酰奎宁酸标准曲线；根据提取液的各成分的液相色谱图中色谱峰的峰面积及各成分的标准曲线，计算得到提取液中新绿原酸、绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸、4，5-二咖啡酰奎宁酸的含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述吸附剂为β-环糊精。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述一定的药材和吸附剂的质量比为1∶3。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，研磨时间为120s。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述洗脱液为80％甲醇。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述洗脱液的体积为0.5mL。