[发明专利]一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法在审
| 申请号： | 201510705160.0 | 申请日： | 2015-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN105176975A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 王悦;刘明浩;陈光辉;李恩宇;张雪莉;方希林;关列梅 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人： | 何为;袁颖华 |
| 地址： | 410128 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 转化 鉴定 稻瘟病 菌丝 dna 快速 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法，其特征在于，该方法是将转化的稻瘟病菌菌丝进行培养后，无菌条件下挑取1mg菌丝置于加入有DNA提取缓冲液的96孔PCR板中，再将该PCR板于95-100℃水浴处理8-10min，取出PCR板，常温冷却，即可；
其中，上述DNA提取缓冲液是0.5ml1MpH＝8.0的Tris-HCl、0.1ml0.5MpH＝8.0的EDTA和1ml2％的TritonX-100加ddH2O定容至50ml配制而成；
上述PCR板中DNA提取缓冲液的加入量是根据转化子的数量，每孔加入30ulDNA提取缓冲液。
2.如权利要求1所述的一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法，其特征在于，所述菌丝培养是于25-28℃倒置黑暗培养3-5天，采用的培养基为筛选培养基。
3.如权利要求2所述的一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法，其特征在于，所述筛选培养基的配方：每升培养基含30g燕麦片、15g琼脂、1ml潮霉素B及1ml50mg/L的硫酸链霉素。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法在稻瘟病菌转化子鉴定中的应用。
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