[发明专利]金线莲组培苗的培育方法

权利要求书

1.一种金线莲组培苗的培育方法，其特征在于包括以下步骤：

A、将金线莲蒴果的种子均匀洒在诱导培养基表面进行培养25天～35天，种子萌发形成原球茎；所述诱导培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6；

B、将原球茎转接到增殖培养基进行培养，2个月后发育成小苗，小苗转接到增殖培养基上进行继代培养，每隔30天～35天继代1次，得到丛生芽；所述增殖培养基的配方是：在MS培养基的基础上，加入2.0mg/L的6-苄氨基嘌呤（6-BA）、0.1mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、100g/L的土豆汁、30g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6；

C、丛生芽长高至2.5厘米～3.5厘米时，将丛生芽分割成单株并转接在生根培养基上诱导生根，一个月后单株长出1厘米～3厘米的根，即得本金线莲组培苗；所述生根培养基的配方是：在1/2MS培养基的基础上，加入0.8mg/L的a-萘乙酸（NAA）、200mg/L的水解酪蛋白（CH）、0.5mg/L的活性炭、15g/L的蔗糖、4.5g/L的琼脂，PH5.4～5.6。

2.根据权利要求1所述的金线莲组培苗的培育方法，其特征在于：步骤A、步骤B和步骤C的培养环境为：培养温度（23±2）℃，光照强度1500勒克斯～2000勒克斯，光照时间为12小时/天。

3.根据权利要求1或2所述的金线莲组培苗的培育方法，其特征在于：

所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基的制备步骤包括：

（1）按所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基的配方分别配制所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基，调节PH5.4～5.6；

（2）分别将配制好的所述诱导培养基、所述增殖培养基和所述生根培养基进行加热，至琼脂完全溶解，趁热分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；

（3）将分装有各种培养基的培养瓶及时放入高压灭菌锅中，在温度121℃、压力105KPa下灭菌21分钟。

4.根据权利要求1或2所述的金线莲组培苗的培育方法，其特征在于：步骤A中先将金线莲蒴果进行消毒处理后，再取用种子；所述消毒处理是在超净工作台上将金线莲蒴果放置于75%的酒精中消毒30秒，然后用0.1%HgCl2水溶液侵泡8分钟～10分钟，再用无菌水冲洗5次～6次。

5.根据权利要求3所述的金线莲组培苗的培育方法，其特征在于：步骤A中先将金线莲蒴果进行消毒处理后，再取用种子；所述消毒处理是在超净工作台上将金线莲蒴果放置于75%的酒精中消毒30秒，然后用0.1%HgCl2水溶液侵泡8分钟～10分钟，再用无菌水冲洗5次～6次。