[发明专利]一种超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法

权利要求书

1.一种超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)对第一培养基进行超声波震荡处理，处理后将大肠杆菌菌种接种于第一培养基中，将培养基固定在离心旋转机中，转速1～4秒/转，37.0～38.0℃条件下培养12～18小时，得到一级培养种子；

2)对第二培养基进行超声波震荡处理，处理后将将步骤1)得到的一级培养种子接种到第二培养基中，将培养基固定在离心旋转机中，转速1～3秒/转，35.0～36.0℃条件下培养12～18小时，得到二级培养种子；

3)将步骤2)得到的二级培养种子接种于菌液中，再导入至离心管中，加入12～16％的琼脂，摇床过夜，再加入氯化钙溶液，混悬菌液，离心分离，将上层清液去除，即得。

2.根据权利要求1所述的超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法，其特征在于：步骤1)中，所述的第一培养基中的营养成分包括：硫酸铵、磷酸氢二钠、七水硫酸镁、甘油、二水钼酸钠、生物素、硫酸锰、六水氯化钴和蒸馏水。

3.根据权利要求2所述的超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法，其特征在于：步骤2)中，所述的第二培养基中的营养成分包括：葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、六水氯化铁、硼酸、谷氨酸钠和蒸馏水。

4.根据权利要求1至3任一所述的超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法，其特征在于：步骤1)中，超声频率为10kHz～30kHz，超声功率30w，处理时间30～45分钟。

5.根据权利要求1至3任一所述的超声波震荡式大肠埃希菌的培养方法，其特征在于：步骤2)中，超声频率为10kHz～30kHz，超声功率50w，处理时间40～60分钟。