[发明专利]一种禽类蛋壳中有机基质的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于有机基质的提取技术领域，具体涉及一种禽类蛋壳中有机基质的提取方法。

背景技术

禽类蛋壳属于生物矿化物质，由有机物质和大量矿物质共同构成，要获取蛋壳中的有机基质首先必须充分去除与之紧密结合的矿物质。目前，去除禽类蛋壳中的矿物质，提取有机基质主要有两种方法：一种是采用0.6MEDTA(相当于质量浓度22.5％)去除矿物质；另一种是采用一次性加入体积浓度50％乙酸或低浓度盐酸去除矿物质。采用0.6MEDTA去除矿物质，会使得提取出来的蛋壳有机基质结合EDTA，难以除去，影响后续的深加工。而采用一次性加入高浓度乙酸或者低浓度盐酸去除矿物质的过程中，有机基质长时间处于极低pH环境(即强酸环境)中，会使部分有机基质的成分受到破坏，影响提取得到的有机基质的性能和品质。

此外，禽类蛋壳脱矿后，需要对乙酸和溶解的矿物盐进行透析去除，目前缺乏程序性的透析工艺。

再者，现有的禽类蛋壳有机基质提取技术最终获得的仅仅是一组基质，其中包含多种成分，不利于后续的精细开发应用。

发明内容

有鉴于此，实有必要提供一种禽类蛋壳中有机基质的提取方法，采用低浓度的乙酸进行脱矿，低浓度乙酸的酸性较弱，有利于保护禽类蛋壳中的有机基质，使其不被破坏。同时，乙酸分阶段逐步加入，可以进一步保护有机基质不被破坏，还可以更有效地实现脱矿效果。且乙酸极易溶于水，有利于后续过程中乙酸的去除。

本发明提供了一种禽类蛋壳中有机基质的提取方法，所述方法包括：

采用EDTA(乙二胺四乙酸，EthyleneDiamineTetraaceticAcid)去除蛋壳外表面有机物质及内表面壳膜，并粉碎成末；

往粉碎后的蛋壳粉末中加入体积浓度2-23％的乙酸水溶液，对所述蛋壳进行脱矿处理；每100重量份蛋壳粉末，需要1500-3000重量份、体积浓度为2-23％的乙酸水溶液；

在16℃以下，将脱矿处理后的溶液经离心分离出第一上清液和第一沉淀物，所述第一沉淀物即为酸不溶性有机基质。

本发明所述的禽类蛋壳包括但不限于鸡、鸭、鹅、火鸡、鸵鸟、孔雀、鹌鹑、鸟类等蛋壳。

优选地，所述采用EDTA去除蛋壳外表面有机物质及内表面壳膜，并粉碎成末具体包括：

采用重量浓度2-10％EDTA浸泡所述蛋壳10-40min后，洗去所述蛋壳外表面的有机物质和内表面的壳膜，晾干/烘干后，将蛋壳粉碎成末。

优选地，所述往粉碎后的蛋壳粉末中加入体积浓度2-23％的乙酸水溶液，对所述蛋壳进行脱矿处理具体包括：

配置体积浓度为2-23％的乙酸水溶液；

往100重量份的蛋壳粉末中，加入500-1000重量份的配置好的乙酸水溶液，于20℃以下搅拌脱矿4-12小时；按照相同处理先后共3次加入配置好的乙酸水溶液，以使矿物质充分溶解。

优选地，所述脱矿处理的搅拌速度为500-1200转/分钟(rmp)。

优选地，所述在16℃以下，将脱矿处理后的溶液经离心分离出第一上清液和第一沉淀物，具体包括：

在16℃以下，以20000-40000xg离心力离心10-30min，分离出第一上清液和第一沉淀物，将第一沉淀物用ddH₂O(重蒸水)洗涤，以20000-40000xg离心力离心两次，将第一沉淀物冻干得酸不溶性有机基质。

优选地，所述方法还包括：

将所述第一上清液用透析袋进行透析脱盐脱酸；

在16℃以下，将透析脱盐脱酸后的溶液进行离心分离出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即为水不溶性有机基质。

优选地，所述将所述第一上清液用透析袋进行透析脱盐脱酸，具体包括：用去离子水对所述第一上清液进行透析脱盐脱酸，所述透析袋分子截留量为2-15kDa，透析时间为4-12小时，所述第一上清液与所述去离子水的体积比为1:(20-30)；用去离子水重复透析脱盐脱酸三次后，用ddH₂O(重蒸水)透析脱盐脱酸4-20小时。

优选地，所述在16℃以下，将透析脱盐脱酸后的溶液进行离心分离出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即为水不溶性有机基质，具体包括：

在16℃以下，以2000-6000xg离心力离心10-60min，将透析脱盐脱酸后的溶液离心分离出第二上清液和第二沉淀物，将第二沉淀物洗涤1次以上，以2000-6000xg离心力离心10-60min后，将第二沉淀物冻干，获得水不溶性有机基质。

优选地，所述方法还包括：