[发明专利]一种VEGFR2阻断剂多肽及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及药物领域，具体涉及用于阻断VEGFR2的结合，治疗卵巢癌的VEGFR2阻断剂多肽。

背景技术：

卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。但卵巢上皮癌死亡率却占各类妇科肿瘤的首位，对妇女生命造成严重威胁。由于卵巢的胚胎发育、组织解剖及内分泌功能较复杂，早期症状不典型，术前鉴别卵巢肿瘤的组织类型及良恶性相当困难。卵巢恶性肿瘤中以上皮癌最多见，其次是恶性生殖细胞肿瘤。卵巢上皮癌患者手术中发现肿瘤局限于卵巢的仅占30％，大多数已扩散到子宫，双侧附件，大网膜及盆腔各器官。目前治疗方法有：.手术治疗、化学治疗、放射治疗等。由于卵巢恶性肿瘤尤其是上皮癌很早扩散，手术时多数病例已不能清除病灶，而且放疗的效果及应用也很有限，因此全身性化疗是一项重要的辅助治疗方法。尤其是恶性生殖细胞肿瘤，规范化疗可明显提高患者生存率。一些晚期病人，经化疗后肿块可以缩小，为手术时满意减瘤创造有利条件。但抗肿瘤药物存在使得患者免疫低下，掉发、呕吐、体重下降等副作用，限制其应用。如何寻找高效，副作用低的抗卵巢癌药物成为亟待解决的难题。

肿瘤的生长离不开血管的新生及各种生长因子的刺激与释放，抑制肿瘤新生血管可能成为治疗肿瘤的一种有效方法。血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的高表达与实体肿瘤的形成及其转移密切相关，VEGF通过与血管内皮细胞膜上的特异性受体(Vascularendothelialgrowthfactorreceptor，VEGFR)结合来激活信号传导的胞中有高表达，而在健康的成人身体内表达水平很低甚至不表达。VEGFR2可促进血管内皮细胞增殖、迁移及增加毛细血管通透性。肿瘤血管内皮细胞的有丝分裂与肿瘤微血管的渗透性主要是通过VEGF与VEGFR2的相互作用而发生的。因此，VEGFR2阻断剂，可以有效抑制VEGF与VEGFR2结合，进而有效抑制肿瘤增殖，迁移，达到抑制肿瘤生长的目的。

发明内容：

本发明提供全新的序列，该序列阻断VEGFR2结合VEGF，对卵巢癌具有很好的疗效。

技术方案

VEGFR2阻断剂多肽，其特征在于其序列为ADHEFFIMTSYPPWRGD。

一种药物组合物，其特征在于其包含如权利要求1所述多肽与一种以上药学上可接受的赋形剂、填充剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、或稳定剂。

所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物为注射剂。

所述的VEGFR2阻断剂多肽，其特征在于有效剂量为10mg/kg。

所述的VEGFR2阻断剂多肽，在治疗卵巢癌药物中的应用。

有益结果：

本发明中的VEGFR2阻断剂多肽1序列ADHEFFIMTSYPPWRGD，可以阻断VEGF结合VEGFR2，进而影响VEGF下游信号传导，实现抗肿瘤目的。本发明采用卵巢癌体内外模型验证了其可以有效抑制肿瘤增殖，生长，可以作为有效的抗肿瘤候选药物，为开发新一代抗肿瘤药物提供新的选择。

具体实施方式

本发明涉及多肽(ADHEFFIMTSYPPWRGD)由吉尔生化(上海)合成。人卵巢癌SK-OV-3购自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。

实施例1

VEGFR2阻断剂多肽对人卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的作用

采用MTT比色法：

1、细胞培养：人卵巢癌细胞系SK-OV-3用含10％胎牛血清的McCoy’s5A培养基，在37℃、5％CO2、饱和湿度条件下培养，为上皮细胞型，贴壁生长。每2～3天用0.25％胰酶和0.02％EDTA常规消化、1:3～1:6传代培养。

2、将对数生长的SK-OV-3细胞，以1.0×105加入96孔培养板中，培养24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物VEGFR2阻断剂多肽和阳性对照药物长春新碱；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养48h，每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶标仪620nm处测定吸光度A值，按公式肿瘤细胞生长抑制率＝(1-实验组吸光值/对照组吸光值)×100％。计算出实验药物的IC50为0.41μM。而阳性对照药物长春新碱0.39μM，两者没有显著性差异，说明本发明多肽具有抑制人卵巢癌作用。

实施例2VEGFR2阻断剂多肽对人卵巢癌细胞SK-OV-3裸鼠异种移植肿瘤生长的抑制试验