[发明专利]一种用于分型检测幽门螺杆菌感染的蛋白芯片

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于分型检测幽门螺杆菌感染的蛋白芯片，属于生物芯片技术领域。

背景技术

幽门螺杆菌(Hp)能在人体内生长、繁殖，又能经粪便、唾液排除体外，通过口-口传播，粪-口传播、内窥镜传播、密切接触等途径在人群中传播。在发展中国家，近80％未满10岁的儿童和超过90％的成年人被感染。

经过多年研究发现Hp的细胞毒素相关蛋白A(CagA)、细胞空泡毒素A蛋白(VacA)和尿素酶(Ure)等蛋白能够刺激机体产生强烈的免疫反应，在Hp感染患者的血清中可检测到相应的抗体。对这些抗原的抗体进行联合检测，不仅能提高对幽门螺旋杆菌检测的敏感性、特异性，而且能够获得更多的感染病原体相关信息，为临床医生的诊断和治疗提供帮助。

依据分泌毒素的情况不同，可以将Hp分为能产生毒素的I型菌株和不能产生毒素的是II型菌株。I型Hp菌株感染引起的疾病主要包括：慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、慢性胃炎和十二指肠溃疡以及胃癌等多种消化道疾病，还可能引起口臭、性疾病、皮肤病等其他相关疾病。除此之外，I型Hp感染还是胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤发展的一个重要因素，与MALT淋巴瘤及胃癌的发生密切相关。II型Hp菌株由于不能产生细胞毒素，毒力低，感染后一般只引起慢性浅表性胃炎。

人类感染Hp后，在血液和胃液中产生特异性IgG、IgM和IgA抗体，可用于Hp感染的血清免疫学诊断。

幽门螺杆菌的临床或实验室诊断方法主要有：¹³C和¹⁴C尿素呼气实验、直接涂片、细菌分离培养、快速尿素酶实验(RUT)、病理学组织切片染色、血清免疫学方法等。其中¹³C和¹⁴C尿素呼气实验为检测“幽门螺旋杆菌”的“金标准”，但是该方法只能检测是否感染幽门螺杆菌而无法判断感染情况并且检测费用比较高；直接涂片、细菌分离培养、快速尿素酶实验(RUT)、病理学组织切片染色需要通过胃镜取材，属于创伤性，检测病人痛苦大，不易接受，存在取样不准确导致的假阳性；血清免疫学方法主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合法、免疫印迹法、乳胶凝集试验和血凝试验，其中以ELISA法最为常用。ELISA法准确率高达90％～95％。目前普遍认为，ELISA检测外周血的抗HpIgG的灵敏度高、特异性高、重复性好，易于推广应用，但是一次只能检测一个检测项，检测时间较长；胶乳凝集试验，用结合在胶乳颗粒上的Hp检测微量血中的抗体，优点是不需仪器，血样需量少，结果需要经验，且准确性不满意；Western-blot主要用于分析感染者血中对Hp多种抗原组分的抗体产生情况，可以控制抗原制备质量和分析与其他类似菌的交叉反应但操作复杂，技术难度大且不稳定，不作常规诊断方法。

目前已获得上市的与产品类似的主要有幽门螺杆菌抗体检测试剂盒(胶体金法)；幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒(胶体金法)；幽门螺杆菌IgG抗体检测剂盒(胶体金法)。上述产品所使用的检测抗原或为单一的Ure蛋白(如金标法)，仅能检测患者血清中的抗Ure抗体，因此阳性率有限；或为混合抗原只能检测幽门螺杆菌是否感染，无法判断是I型和II型感染。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种用于分型检测幽门螺杆菌感染的蛋白芯片。

本发明的用于分型检测幽门螺杆菌感染的蛋白芯片，包括基膜和以点阵的形式分别点在基膜上的抗原，所述的抗原有三种：CagA抗原、VacA抗原和Ure抗原。

所述的基膜上还固定有阴性对照和反应对照。

含有本发明的用于分型检测幽门螺杆菌感染的蛋白芯片的试剂盒，包括：

1)洗涤液：由TBE和饱和硫酸铵溶液组成；

2)显色剂：葡萄球菌A蛋白胶体金标记物；

3)蛋白芯片。

本芯片是以患者血清为样本，可以同时检测受试者是否感染CagA、VacA和Ure3种抗体，从而判断为几型感染，更利于临床医生的诊断和治疗。