[发明专利]一种旱柳优树花粉离体萌发培养基及用于测定旱柳花粉活力的方法

权利要求书

1.一种旱柳优树花粉离体萌发培养基，其特征在于，是以蒸馏水为溶剂，其成分含有8-12g/L的琼脂、140-160g/L的蔗糖和0.1-0.3g/L的硼酸。

2.如权利要求1所述的旱柳优树花粉离体萌发培养基，其特征在于，是以蒸馏水为溶剂，其成分含有10g/L的琼脂、150g/L的蔗糖和0.2g/L的硼酸。

3.权利要求1或2所述的培养基在旱柳优树花粉离体萌发培养中的应用。

4.权利要求1或2所述的旱柳优树花粉离体萌发培养基的制备方法，其特征在于，将琼脂加入到蒸馏水中，隔水加热，溶解后，加入蔗糖和硼酸，搅拌后即成灭菌培养液；将配好的灭菌培养液趁热滴一滴于载玻片凹槽中央，使其扩散成一略带弧度的平面且基本完全铺满凹槽，冷凝后即为旱柳优树花粉离体萌发培养基。

5.权利要求1或2所述的旱柳优树花粉离体萌发培养基用于测定旱柳花粉活力的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)花粉采集

选取发育正常、无病虫危害、生长健壮的旱柳植株，从树冠中上部剪取直径1-2.5cm、长1-1.5m的花枝,在温度20-25℃，相对湿度60-70％条件下水培；待雄花序下端有少量的熟花粉散落时，收集花粉，放入干燥器内，于0-5℃条件下贮藏；

(2)花粉离体培养

将花粉从干燥器中取出，在0-5℃的温度和50-90％的相对湿度条件下，使其吸水20-28h，将吸水后的花粉均匀撒在位于载玻片上的旱柳花粉离体萌发培养基上，然后将载玻片置入有湿润滤纸的培养皿内，并置于恒温光照培养箱中培养；

(3)花粉活力的测定

保持上述温度条件促使花粉管生长，离体培养4-10h后，将载玻片在显微镜下观察，进行花粉萌发率统计，以花粉管长度大于花粉粒直径为花粉萌发标准，每处理重复3次以上，每重复随机观察3～5个视野，统计花粉萌发率以反映有活力的花粉所占比例。

6.如权利要求5所述的测定旱柳花粉活力的方法，其特征在于，步骤(2)中，恒温光照培养箱的培养条件为：培养温度为25℃，光照强度为5000lx。

7.如权利要求5所述的测定旱柳花粉活力的方法，其特征在于，步骤(3)中，花粉萌发率的计算公式为：花粉萌发率＝(萌发花粉数/总花粉数)×100％。