[发明专利]一种DNA测序仪反应记录分系统有效

专利信息
申请号: 201510716526.4 申请日: 2015-10-29
公开(公告)号: CN105273979B 公开(公告)日: 2016-11-16
发明(设计)人: 张睿;冯玉臣;范东雨;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风 申请(专利权)人: 北京中科紫鑫科技有限责任公司
主分类号: C12M1/00 分类号: C12M1/00;C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 101111 北京市大兴区经济技术*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 dna 测序仪 反应 记录 分系统
【说明书】:

技术领域

发明涉及DNA测序领域,尤其涉及一种DNA测序仪反应记录分系统。

背景技术

在DNA测序技术领域,焦磷酸测序技术(pyrosequencing),是由Nyren等人于1987年发展起来的一种新型的酶级联测序技术,其可重复性和精确性能与Sanger法DNA测序技术相媲美,而速度却大大提高。焦磷酸测序技术是由4种酶催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应。

焦磷酸测序技术的原理是:引物与模板DNA退火后,在DNA聚合酶(DNApolymerase)、ATP硫酸化酶(ATPsulfurylase)、荧光素酶(luciferase)和三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)四种酶的协同作用下,将引物上每一个dNTP的聚合与一次光信号的释放偶联起来,通过检测光的释放和强度,达到实时测定DNA序列的目的。焦磷酸测序技术的反应体系由反应底物、待测单链、测序引物和四种酶构成。反应底物为5’-磷酰硫酸(adenosine-5’-phosphosulfate,APS)和荧光素(luciferin)。在每一轮测序反应中,反应体系中只加入一种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),如果它刚好能和DNA模板的下一个碱基配对,则会在DNA聚合酶的作用下,添加到测序引物的3’末端,同时释放出一个分子的焦磷酸(PPi)。在ATP硫酸化酶的作用下,生成的PPi可以和APS结合形成ATP,在荧光素酶的催化下,生成的ATP又可以和荧光素结合形成氧化荧光素,同时产生可见光。通过微弱光检测装置及处理软件可获得一个特异的检测峰,峰值的高低则和相匹配的碱基数成正比。待上一轮反应完成后,加入另一种dNTP,使上述反应重复进行,根据获得的峰值图即可读取准确的DNA序列信息。

整体操作流程描述如下:DNA样品通过破碎后,应用建库试剂进行加接头、单链捕获、结合至微球、微乳液PCR扩增、破乳液,获得建立在微球上的DNA文库,应用加样板将文库和测序反应需要的酶等铺放至具有微反应池的测序芯片,测序芯片和测序试剂安装至主机上,通过控制计算机根据模块数量和位置启动测序程序,自动化进行测序反应,产生的数据传输至数据分析计算机,完成测序后应用计算分析软件进行图像处理、序列读出、质量分析、序列拼接等工作,最终得到DNA样本的序列信息。。微反应池测序芯片是测序反应的载体,载有测序模板的DNABeads及各种测序反应用酶均位于刻有微反应池的测序芯片中。

测序过程中,在测序芯片上发生化学反应,产生可见光,通过CCD(ChargeCoupleDevice)相机捕捉测序反应所产生的光信号,即可得到所需要的测序信息。在测序仪中,反应记录分系统对测序反应的信息进行采集,要求反应仓具有足够的精度以及安装的可调整性,反应仓作为测试反应的主要载体,还应具有足够的稳定性。

鉴于上述缺陷,本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本创作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种DNA测序仪反应记录分系统,用以克服上述技术缺陷。

为实现上述目的,本发明提供一种DNA测序仪反应记录分系统,其包括反应仓组件、运动平台组件、运动控制单元、CCD相机和平台支撑组件,其中,

所述的反应仓组件,其内设置反应芯片组件,在控制系统的作用下,反应液进入反应芯片中进行化学反应,产生可见光;

所述的运动平台组件,其将CCD相机进给到适当的拍照位置,以使CCD相机对反应芯片中产生的可见光信息进行拍照采集;

所述的平台支撑组件,其支撑所述的反应仓组件、运动平台组件;

所述的运动控制单元,其对CCD相机以及反应芯片的运行实时控制,驱动运动平台组件运动到CCD相机的拍照位置,检测并控制反应仓的温度;

所述的反应仓组件包括设置在所述的平台支撑组件上的竖直的门架,在门架的外侧的上部设置有可翻转反应仓组件,在可翻转反应仓组件的下端连接有可翻转底座,可翻转底座固定在门架的中部,可翻转反应仓组件可绕所述的可翻转底座旋转,用以取出或者放入反应芯片;

所述的可翻转反应仓组件包括可翻转仓体,在可翻转仓体的内侧设置有反应芯片组件,在反应芯片组件中安装有反应芯片,试剂液通过反应芯片发生化学反应。

进一步地,所述的平台支撑组件包括减震板和设置在减震板两侧部的第一减震翼板和第二减震翼板,在两个减震翼板的下端分别设置有减震组件;

平台支撑组件呈凹口状,反应仓组件安装在减震板上,两端分别与两个减震板接触。

进一步地,所述的减震翼板包括支撑板,其具有一定的高度,支撑所述的反应仓组件;

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