[发明专利]肉苁蓉提取物在骨髓间充质干细胞中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及肉苁蓉提取物在骨髓间充质干细胞中的应用，尤其涉及肉苁蓉提取物对骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的保护作用。

背景技术

随着现代工业的迅猛发展，镉污染问题日益严重，大量的研究表明少量的镉(Cd)进入人体即可通过生物放大作用和生物积累；镉是被国际公认的致癌物质之一，镉是一种毒性很强的重金属,已被美国毒性管理委员会(ATSDR)列为第6位危害人类健康的有毒物质。镉不仅可引起机体的急性和慢性中毒，而且对哺乳动物具有较强的致畸、致癌、致突变作用。

骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)是临床细胞与移植治疗的重要种子细胞，同时其在生物或化学性致癌环境中的遗传稳定性及其防治措施研究，日益成为其安全临床应用研究的热点。本课题组前期已初步研究证实，CdCl₂可诱发BMSCs形态出现异型性，微核发生率、染色体畸变率、细胞凋亡及DNA的损伤均显著增加。肉苁蓉归经甘、咸、温。归肾、大肠经，气微，味甜、微苦。为我国传统的名贵中药材，是补肾壮阳处方中使用频率最高的补益药物之一。具有补肾阳，益精血，润肠通便之功效。现代药理研究，肉苁蓉具有抗肿瘤、增强免疫能力、抗氧化的作用。

发明内容

本发明提供了肉苁蓉提取物在骨髓间充质干细胞中的应用，涉及到肉苁蓉提取物对骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的保护作用，尤其涉及肉苁蓉超滤膜提取物对化学毒性物质氯化镉(CdCl₂)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖、细胞微核率和染色体畸变率的保护作用。

本发明提供肉苁蓉提取物在骨髓间充质干细胞中的应用。

作为优选，所述应用为肉苁蓉提取物对骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的保护作用。本发明还提供肉苁蓉提取物在制备保护骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的药物中的应用。

作为优选，所述应用为肉苁蓉提取物对镉元素诱导的骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的保护作用。本发明还提供肉苁蓉提取物在制备保护镉元素诱导环境下的骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的药物中的应用。

作为优选，所述肉苁蓉提取物的分子量为200,000以下。

作为优选，所述肉苁蓉提取物的分子量为10,000以下。

作为优选，所述肉苁蓉提取物的浓度为0.8g/L。

作为优选，所述肉苁蓉提取物的制备方法为：将肉苁蓉水提，用超滤膜过滤水提液，根据分子量要求收集截留液或透过液，干燥，得到肉苁蓉提取物。

更优选地，所述将肉苁蓉水提是加入8倍重量的水提取1次，提取时间为1小时；再加入6倍重量的水提取2次，每次提取1小时。

本发明贴壁培养了小鼠BMSCs细胞株，随机分为正常对照组、模型对照组、肉苁蓉超滤膜提取物不同分子量段干预组，模型组与干预组以CdCl₂诱导的BMSCs染毒。显微镜下观察各组BMSCs的形态学变化，通过微核实验、染色体分析观察对BMSCs细胞微核率、染色体畸变率的影响，并通过流式细胞仪检测肉苁蓉对CdCl₂染毒的BMSCs细胞凋亡各自的影响。结果可见：不同分子量段的肉苁蓉超滤膜提取物均可以减小CdCl₂诱导的BMSCs微核数、微核率、染色体畸变率的发生，可以降低细胞的凋亡率；且以分子量10,000以下效果最明显；与模型组相比均具有显著性差异(p<0.05)。中药肉苁蓉提取物可以通过减少细胞的凋亡来降低BMSCs的微核率和染色体畸变率，以提高BMSCs的遗传稳定性。由实验结果可知，肉苁蓉提取物能够作为保护骨髓间充质干细胞的增殖和遗传稳定性的药物使用。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为不同分子量段肉苁蓉超滤物对CdCl₂诱导的BMSCs增殖的形态观察(10×10)，其中，图A为对照组，图B为模型组，图C为10,000分子量以下肉苁蓉超滤物组，图D为10,000-100,000分子量肉苁蓉超滤物组，图E为100,000-200,000分子量肉苁蓉超滤物组；