[发明专利]固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法及其固定脂肪酶的方法

权利要求书

1.固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、采用溶剂热法制备Fe₃O₄纳米粒子；

二、采用stober法在Fe₃O₄纳米粒子外面包裹一层介孔硅，得到具有核壳结构的磁性介孔硅，记为Fe₃O₄MCM-41；

三、采用hummers法制备氧化石墨；

四、按Fe₃O₄MCM-41的质量与氧化石墨的质量比为1：(100～150)的比例称取步骤二制备的Fe₃O₄MCM-41、量取步骤三制备的氧化石墨分散液，先把Fe₃O₄MCM-41分散到无水乙醇中，再加入氧化石墨分散液，混合液搅拌1～2h，然后滴加3-氯丙基三乙氧基硅烷，升温至120～130℃，搅拌回流10～12h，最后用无水乙醇洗涤干净，冷冻干燥，得到固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体。

2.根据权利要求1所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于Fe₃O₄纳米粒子的制备方法如下：按六水合三氯化铁与硝酸钠的质量比为1：(2～3)将六水合三氯化铁与硝酸钠溶解在乙二醇中，然后转移到反应釜中，升温至190～200℃并保持19～20h，然后降至常温，将得到的沉淀物分别用无水乙醇和丙酮洗涤干净，最后用磁铁收集，将收集的黑色产物在50～60℃条件下真空干燥，得到Fe₃O₄纳米粒子。

3.根据权利要求2所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于六水合三氯化铁与硝酸钠的质量之和与乙二醇的体积的比为1g：(9～10)ml。

4.根据权利要求1或2所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于步骤二中Fe₃O₄MCM-41的制备方法如下：称取Fe₃O₄纳米粒子、十六烷基三甲基溴化铵、正硅酸乙酯和质量浓度为25％的氨水；将Fe₃O₄纳米粒子加入到无水乙醇中超声分散，得到Fe₃O₄分散液；将十六烷基三甲基溴化铵加入到蒸馏水中，搅拌溶解均匀，得到模板剂溶液；将Fe₃O₄分散液加入到模板剂溶液中，混合均匀后，加入称取的正硅酸乙酯，再混合均匀后，加入称取的质量浓度为25％的氨水，在室温下搅拌6～10h，分离出固相物，用无水乙醇和丙酮洗涤干净，再进行用磁铁收集，将收集的产物于50～60℃条件下真空干燥10～12h，得到复合Fe₃O₄纳米粒子，将该复合Fe₃O₄纳米粒子分散在酸化乙醇中，在80～85℃下索氏提取10～12h，干燥后，得到Fe₃O₄MCM-41。

5.根据权利要求4所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于Fe₃O₄纳米粒子与十六烷基三甲基溴化铵的质量比为1：(1～1.2)；Fe₃O₄纳米粒子的质量与正硅酸乙酯的体积的比为1g：(5～8)ml；正硅酸乙酯与质量浓度为25％的氨水的体积比为1：(5～6)。

6.根据权利要求4所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法，其特征在于酸化乙醇是将2ml质量百分浓度为35～37％的盐酸加入到50ml无水乙醇中，混合均匀后得到的。