[发明专利]一种调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子及其应用在审
申请号: | 201510729014.1 | 申请日: | 2015-10-30 |
公开(公告)号: | CN105177007A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
发明(设计)人: | 唐克轩;陈俏;沈乾;付雪晴;石璞;孙小芬;颜廷祥 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 调控 基因 分泌 腺毛 表达 启动子 及其 应用 | ||
1.一种调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子,其特征在于,所述启动子的核苷酸序列如SEQIDNo:1所示。
2.一种如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子,其特征在于,所述启动子上的顺式作用元件包括:CGTCA-motif、HSE、MBS、MRE、TC-richrepeats、WUN-motif。
3.一种制备如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、从青蒿基因组中克隆所述启动子的基因组序列;
步骤二、分析所述启动子上的顺式作用元件,确定所述启动子类型;
步骤三、将步骤一中获得的所述启动子的序列与载体连接;
步骤四、将步骤三中获得的载体转化根癌农杆菌;
步骤五、将步骤四中获得的带有所述载体的所述根癌农杆菌稳定转化植物;
步骤六、检测所述启动子的转入,并确定所述启动子所引导的基因在植株中的表达部位。
4.如权利要求3所述的制备如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子的方法,其特征在于,所述步骤一包括以基因组DNA为模板,采用两轮巢式PCR方法扩增所述启动子序列。
5.如权利要求3所述的制备如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子的方法,其特征在于,所述步骤三中的载体为pCAMBIA1391z,利用引物对1391z-proTPS7-F和1391z-proTPS7-R,通过PCR在获得的所述启动子序列中引入酶切位点PstI和NcoI,从而连接到载体pCAMBIA1391z上,其中引物序列如下所示:
1391z-proTPS7-F:5’-AACTGCAGAAGAGAAAGCTACATACAATGGGAA-3’;
1391z-proTPS7-R:5’-CATGCCATGGGGAGAAAGATCGGTTATGC-3’。
6.如权利要求3所述的制备如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子的方法,其特征在于,所述步骤五包括:
1)外植体的预培养;
2)农杆菌与外植体的共培养;
3)抗性再生植株的筛选。
7.一种载体,其特征在于,所述载体连接有如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子。
8.一种表达盒,其特征在于,所述表达盒包括如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子。
9.一种如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子用于利用植物腺毛组织表达和在植物生产代谢产物的基因工程育种中的应用。
10.一种如权利要求1所述的调控基因在非分泌型腺毛中表达的启动子在非分泌型腺毛的发生和发育以及其中的次级代谢产物的代谢调控研究中的应用。
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