[发明专利]鼠疫菌素和噬菌体溶菌酶融合蛋白及其编码基因与应用在审

专利信息
申请号: 201510729178.4 申请日: 2015-11-02
公开(公告)号: CN105237630A 公开(公告)日: 2016-01-13
发明(设计)人: 张灿;任慧英;王婷;孙虎芝;卢国民;孙蓉蓉;刘文华;于杰 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: C07K14/24 分类号: C07K14/24;C12N9/36;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/16;A61K38/47;A61P31/04
代理公司: 济宁宏科利信专利代理事务所 37217 代理人: 樊嵩
地址: 266109 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 鼠疫 菌素 噬菌体 溶菌酶 融合 蛋白 及其 编码 基因 应用
【权利要求书】:

1.一种融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白自氨基端到羧基端依次含有鼠疫杆菌的鼠疫菌素蛋白Pst和噬菌体Bp7的溶菌酶e。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列由330个氨基酸组成,第1-167位为所述鼠疫菌素蛋白Pst,第168-330位为所述溶菌酶e。

3.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列为:MSDTMVVNGSGGVPAFLFSGSTLSSYRPNFEANSITIALPHYVDLPGRSNFKLMYIMGFPIDTEMEKDSEYSNKIRQESKISKTEGTVSYEQKITVETGQEKDGVKVYRVMVLEGTIAESIEHLDKKENEDILNNNRNRIVLADNTVINFDNISQLKEFLRRSVNIVMDIFDMLRQGEGLDLNLYKDTEGYWTIGIGQLVTKNPSKDVARAELDKLMGRVCNGRITMAEAEQLFNRSVENARRAILRNPKLKPVYDVLDEVRRCALINMVFQMGEAGVAGFTNSLRMLQQKRWNDAAVNLAQSRWYKQTPNRAKRVIATFKTGTWAAYR或上述氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的上述氨基酸序列衍生的蛋白。

4.一种鼠疫菌素和噬菌体溶菌酶融合蛋白的编码基因,其特征在于,所述融合蛋白的编码基因选自下述(1)-(3)中任一所述的基因:(1)、蛋白编码序列如下:ATGTCAGATACAATGGTAGTGAATGGTTCAGGTGGTGTTCCGGCTTTTCTCTTTTCCGGAAGTACATTAAGCAGTTACAGACCAAATTTTGAAGCTAATTCGATTACAATTGCATTACCACATTATGTGGATCTGCCTGGCCGGAGTAATTTTAAACTGATGTACATTATGGGGTTTCCGATTGATACGGAGATGGAGAAAGACAGTGAATATTCAAATAAGATCCGCCAGGAAAGTAAAATTTCAAAAACTGAAGGGACCGTGTCTTACGAACAGAAAATAACTGTTGAAACAGGTCAGGAAAAAGACGGTGTGAAAGTCTACCGTGTCATGGTTCTTGAGGGAACGATTGCCGAATCTATTGAACATCTCGATAAGAAAGAGAACGAAGACATTCTGAATAATAACCGAAATCGCATCGTCCTAGCGGACAACACTGTCATTAACTTTGACAATATTAGTCAACTGAAGGAATTTTTACGTCGTTCGGTAAATATTGTTATGGATATTTTTGATATGTTACGTCAAGGCGAAGGTCTTGATTTAAATCTTTATAAAGACACTGAAGGTTATTGGACTATTGGTATTGGCCAGTTAGTTACCAAGAACCCATCTAAAGATGTTGCTCGTGCTGAACTTGATAAGCTTATGGGTCGAGTTTGCAATGGTCGTATTACTATGGCTGAAGCCGAACAACTCTTTAACCGGTCGGTTGAAAATGCTCGTAGAGCTATTCTGCGTAATCCTAAATTGAAACCTGTTTATGATGTACTGGACGAAGTTCGTCGTTGTGCTTTAATTAACATGGTCTTCCAAATGGGTGAAGCAGGTGTAGCAGGGTTCACTAACTCTTTACGTATGCTCCAACAGAAACGTTGGAATGATGCGGCAGTTAACCTGGCCCAATCCCGTTGGTATAAACAAACTCCTAATCGTGCTAAGCGCGTTATCGCCACCTTTAAAACAGGTACTTGGGCTGCTTATAGATAA;

(2)、与(1)限定的DNA分子具有90%以上同源性,且编码所述融合蛋白的DNA分子;

(3)、在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA分子杂交,且编码所述融合蛋白的DNA分子;所述严格条件可为用6×SSC,0.5%SDS的溶液,在65℃条件下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。

5.一种重组表达载体,其特征在于,其在pET28a载体的多克隆位点EcoRI和XhoI之间插入权利要求4所述的片段后得到。

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