[发明专利]一种乳酸菌胞外多糖的制备方法和应用

权利要求书

1.一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将乳酸菌从平板上活化，挑取单菌落至10mlMRS培养液，37℃，180rpm摇床培养12h，得到乳酸菌发酵液；

2)将乳酸菌发酵液以1-5％的接种量接种于MRS液体培养基中，调节初始pH值为4.5-8.5，于25-40℃下，培养8-16h，得乳酸菌胞外多糖；

所述的MRS液体培养基的组成为：按重量百分比，碳源2％，氮源1％，磷酸氢二钾0.1-0.8％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，柠檬氢二胺0.2％，乙酸钠0.5％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，蒸馏水余量；组成的MRS液体培养基的碳氮比为3:1-1:3。

2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：包括纯化步骤，3)纯化：将乳酸菌胞外多糖溶于水中，然后缓慢加入DEAE-D52纤维素柱中，用蒸馏水和0.1-2.0moL/L浓度的NaCl进行梯度洗脱，合并洗脱主峰的洗脱液，于分子量在1000kd-8000kd的透析袋中透析24h。

3.根据权利要求1或2所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的碳源为葡萄糖、乳糖、蔗糖、果糖或壳聚糖。

4.根据权利要求3所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的碳源为葡萄糖。

5.根据权利要求1或2所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的氮源为蛋白胨、胰蛋白胨、尿素、氯化铵或硫酸铵。

6.根据权利要求5所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的氮源为蛋白胨。

7.根据权利要求1或2所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的磷酸氢二钾的含量为0.6％。

8.根据权利要求1或2所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述的MRS液体培养基中，所述的碳氮比为2:1。

9.根据权利要求1或2所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：将乳酸菌发酵液以2％的接种量接种于MRS液体培养基中，调节初始pH值为6.5，于37℃下，培养12h。

10.按照权利要求1或2所述的方法制备的乳酸菌胞外多糖在抗氧化性、抑制肿瘤增值中的应用。