[发明专利]精子基因组DNA的提取试剂及其方法

权利要求书

1.一种精子基因组DNA的提取试剂，其特征在于，包括，

预处理试剂Ⅰ：pH为7.4-8.5，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质：

50-300mM可溶性盐，1-200mMEDTA；

预处理试剂Ⅱ：pH为7.4-8.5，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质：

30-150mMTris.Cl，1-50mM的EDTA，300-700mM可溶性盐，0.5-3％SDS，1-5％β-巯基乙醇；

蛋白酶K：80-120μg/ml；

RNA酶：8-12mg/ml。

2.根据权利要求1所述的精子基因组DNA的提取试剂，其特征在于，所述预处理试剂Ⅰ中的所述可溶性盐是NaCl、KCl或NaAc。

3.根据权利要求1所述的精子基因组DNA的提取试剂，其特征在于，所述预处理试剂Ⅱ中的所述可溶性盐是NaCl、KCl或NaAc。

4.一种使用权利要求1所述的提取精子基因组DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)分离精子，用磷酸缓冲液洗涤三次，离心、去上清；

2)预处理试剂Ⅰ洗涤一次，离心、去上清；

3)清洗后的精子中加入预处理试剂Ⅰ、预处理试剂Ⅱ、蛋白酶K、RNA酶，充分震荡，消化；

4)用基因组DNA抽提试剂盒法进行抽提；

5)溶解并存储。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述精子总数1-20×10⁶个，体积为10～20μl。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤1)中磷酸盐缓冲液用量为：每次500-1200μl。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)预处理试剂Ⅰ的用量为：300～500μl。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤3)中消化时间为6-18h，温度为50-60℃。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤3)中预处理试剂Ⅰ为150-300μl、预处理试剂Ⅱ为150-300μl、30-50μl蛋白酶K、10-30μlRNA酶。

10.包括权利要求1-3任意一项所述的试剂的精子基因组DNA提取试剂盒。