[发明专利]一种家独行菜的组织培养方法在审
申请号: | 201510735440.6 | 申请日: | 2015-11-03 |
公开(公告)号: | CN105248282A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 黄萱;赵杨阳;姜雪;谢登峰;马燕勤;李典珍;李琦;刘佳钰 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 西安西达专利代理有限责任公司 61202 | 代理人: | 谢钢 |
地址: | 710069 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 独行 组织培养 方法 | ||
1.一种家独行菜的组织培养方法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)获取无菌萌发苗
将家独行菜种子进行振荡灭菌,去除家独行菜种子外部包裹的多糖类物质,进而接入MS0固体培养基中获取无菌萌发苗;
(2)选择外植体
在无菌操作台上,将家独行菜无菌萌发苗茎剪切备用;
(3)愈伤组织的诱导
将剪切好的外植体取下胚轴接入加入2,4-D和6-BA的琼脂固化MS愈伤组织诱导培养基,固体培养的条件是:25±1℃下培养,湿度保持65±5%,15-25天后,获得愈伤组织;
(4)丛生芽的诱导
将生长良好的愈伤组织接种到琼脂固化的MS+2,4-D,6-BA,TDZ的不定芽诱导培养基上,培养条件为:25±1℃下培养,湿度保持65±5%,14-21天后,获得丛生的不定芽;
(5)生根培养
取分化的不定芽转入琼脂固化MS+NAA0.4-0.6mg/L的生根培养基中,置于培养室进行生根培养,固体培养条件是2000-25001x日光灯照射,光照10-15h/d,25±1℃下培养,湿度保持65±5%,15-25天后,获得生根小植株。
2.根据权利要求1所述组织培养方法,其特征在于:步骤(1)中在无菌条件下,利用体积比水:5%NaClO:70%乙醇=1:2:7比例的混合溶液对种子进行振荡灭菌20-30min,再用乙醇灭菌30-50s。
3.根据权利要求1所述组织培养方法,其特征在于:步骤(2)中所选的家独行菜具有10-15天苗龄的幼嫩茎部,将茎切成5mm左右茎段。
4.根据权利要求1所述组织培养方法,其特征在于:步骤(3)中,愈伤组织诱导培养基的激素配比是2,4-D1-2mg/L+6-BA0.5-1.0mg/L,光照条件:1600-2000lx,16h/8h。
5.根据权利要求1所述组织培养方法,其特征在于:步骤(4)中,不定芽诱导培养基的激素配比是2,4-D0.2-1mg/L+6-BA1-2mg/L+TDZ0.2-0.6mg/L,光照条件:2000-2500lx,16h/8h。
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