[发明专利]血小板衍生生长因子组合物及其使用方法

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2005年10月12日，申请号为 200580042385.7(PCT/US2005/036447)，发明名称为“血小板衍生生长因子组合物及其使用 方法”。

发明领域

本发明涉及骨和结缔组织的愈合。

发明背景

生长因子是结合细胞表面上的受体的蛋白，主要结果是活化细胞增殖和/或分化。 许多生长因子是相当多能的，在众多不同细胞类型中刺激细胞分裂；而其余的生长因子对 特定细胞类型是特异性的。生长因子的实例包括血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生 长因子IGF-I和II、转化生长因子β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子 (FGF)。PDGF是一种存在于多种细胞类型(包括循环血小板粒细胞、血管平滑肌细胞、内皮细 胞、巨噬细胞和角质形成细胞)中的阳离子热稳定蛋白，已知其刺激成纤维细胞在体外合成 蛋白和生产胶原蛋白。还已知其用作成纤维细胞、平滑肌细胞、成骨细胞和神经胶质细胞的 体外有丝分裂原和趋化剂。

业已表明，重组人PDGF-BB(rhPDGF-BB)在动物和人中均可刺激伤口愈合和骨再 生。其在美国和欧洲均已获准以局部施用用于人类用途，以加速慢性糖尿病足溃疡的痊愈。 还已表明，重组hPDGF-BB单独或者与其它生长因子组合，有效改善牙周再生，即牙周围的 骨、牙骨质和韧带的再生长(参见例如美国专利第5,124,316号，其通过引用结合到本文 中)。

发明概述

我们现在已证实，低剂量的rhPDGF(约0.1-1.0mg/mL)促进骨、牙周组织、韧带和软 骨的修复。少量rhPDGF可吸附至可在修复部位植入的β-TCP，使得rhPDGF在体内被释放。业 已表明，和未处理的β-TCP相比，向β-TCP加入rhPDGF增强成骨细胞附着和增殖。

在第一个方面，本发明的特征为一种在哺乳动物(例如人)中促进骨、牙周组织、韧 带或软骨生长的方法，该方法给予含低于约1.0mg/ml浓度的血小板衍生生长因子(PDGF)的 植入材料，使得植入材料促进骨、牙周组织、韧带或软骨生长。在一个实施方案中，PDGF以低 于或等于0.3mg/ml的量给予。在另一个实施方案中，PDGF以约0.1至约1.0mg/ml范围的量给 予。在几个实施方案中，PDGF以约0.2至约0.75mg/ml之间的量、约0.25至约0.6mg/ml之间的 量和约0.25至约0.5mg/ml之间的量给予。在一个实施方案中，PDGF以约0.1mg/ml、0.3mg/ml 或1.0mg/ml的量给予，优选以0.3mg/mL的量给予。在另一个实施方案中，PDGF是部分或基本 纯化的。在再另一个实施方案中，PDGF由其它杂质中分离或纯化出来。在又一个实施方案 中，PDGF在给予时由植入材料以0.3mg/天的平均速率释放。在另一个实施方案中，PDGF在给 予时由植入材料以300μg/天的平均速率释放。在再另一个实施方案中，PDGF在给予时由植 入材料以低于100μg/天、低于50μg/天、低于10μg/天或低于1μg/天的平均速率释放。优选 地，PDGF在几天(例如1、2、5、10、15、20或25天，或直到28天或更多天)内传递。