[发明专利]一种副球菌FSTB-2的开放式培养方法及其应用

权利要求书

1.一种副球菌FSTB-2的开放式培养方法，其特征在于包括如下内容：在副球菌FSTB-2的开放式培养过程中，投加杀菌剂；所述副球菌（Paracoccus sp.）FSTB-2已于2015年6月1日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏编号为CGMCCNo.10938；所述杀菌剂为林可霉素、利福霉素SV、萘啶酸、盐酸胍中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的开放式培养是指在敞开式容器中进行，所有进入反应器的气体或者补加的料液都不进行无菌处理。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：为防止干扰菌持续性繁殖生长成为优势菌，定期采样稀释后涂布到含有FSTB固体培养基的平板中，对长出的菌落进行计数并统计与FSTB-2相似菌落的百分比，当相似百分比接近50%时投加杀菌剂。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于：所述杀菌剂的投加浓度为0.01-100mg/L，持续投加2-7个培养周期。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的副球菌（Paracoccus sp.）FSTB-2的开放式培养方法包括菌株活化、液体种子液培养、曝气培养、纯菌株检测和优势菌株维护五个阶段，具体步骤是：

（1）菌株活化：将副球菌（Paracoccus sp.）FSTB-2接种到FSTB固体培养基的斜面或者平板中，25-40℃培养24-48小时；

（2）液体种子液培养：配制FSTB液体培养基，分装于三角瓶中，灭菌并冷却至室温后，无菌环境下挑取斜面或平板中活化的菌株接种到三角瓶中，25-40℃培养24-72小时；

（3）曝气培养：在设有曝气装置的开放式反应器中加入FSTB液体培养基或者含盐含COD的废水，按照反应器体积比0.5%-25%的比例接种液体种子液，pH值控制在6.0-8.5，曝气培养48-96小时，之后进行周期性的补料和排料操作，排料量占反应器体积的5%-90%，补料量占反应器体积的5%-90%，培养24-48小时为1个培养周期，之后按照上述比例排出对应体积的培养液，由此得到含有高浓度副球菌的浓菌液产品；

（4）纯菌株检测：采集上述培养完毕的菌液，稀释后涂布到含有FSTB固体培养基的平板中，对长出的菌落进行计数并统计与FSTB-2相似菌落的百分比，当相似菌落百分比接近50%时投加杀菌剂，所述杀菌剂为林可霉素、利福霉素SV、萘啶酸、盐酸胍中的一种或几种，投加浓度为0.01-100mg/L，持续投加2-7个培养周期，上浮的微生物在排水排料时排出，之后恢复正常的开放式培养操作流程；

（5）采集培养完毕的菌液，稀释后涂布到含有FSTB固体培养基的平板中，对长出的菌落进行计数并统计与FSTB-2相似菌落的百分比，相似百分比达到65%以上，副球菌FSTB-2成为优势菌。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述FSTB液体培养基为：FeSO₄•7H₂O 25mg/L，NH₄NO₃ 286mg/L，KCl 929mg/L，CaCl₂ 2769mg/L，NaCl 21008mg/L，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，pH值为6.0-8.5；所述FSTB固体培养基是在液体培养基中加入20g/L琼脂。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的副球菌FSTB-2的开放式培养采用的含盐含COD的废水是经过预处理的化工合成废水、煤化工废水，或者是炼油工艺、煤化工工艺及化工合成工艺产生的废水经过反渗透减量化单元产生的浓盐水；废水中盐含量为0.5wt%-8.0wt%，COD为200-20000mg/L。

8.根据权利要求1或5所述方法培养获得的副球菌FSTB-2的应用，其特征在于：用于盐含量1.0wt%-8.0wt%的含盐废水中COD的脱除，COD的去除率达90%以上。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：当废水处理系统出现异常，直接投加培养获得的浓菌液产品，投加量按照每小时所处理废水体积的0.01%-3%进行投加。