[发明专利]一种耐盐的脱COD脱氮微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种耐盐的脱COD脱氮微生物菌剂，其特征在于菌剂中含有副球菌（Paracoccus sp.）FSTB-2、北见微杆菌（Microbacterium kitamiense）FSTB-4、施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri）FSTB-5中的至少一种，同时含有脱氮副球菌(Paracoccus denitrificans) DN-3和甲基杆菌(Methylobacterium phyllosphaerae)SDN-3中的至少一种，其中副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4、施氏假单胞菌FSTB-5已经于2015年6月1日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏编号分别为CGMCC No.10938、CGMCC No.10939、CGMCC No.10940；脱氮副球菌DN-3和甲基杆菌SDN-3已经于CN102465104A、CN102465103中公开，保藏编号分别为CGMCC No.3658和CGMCC No.3660。

2.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：“脱氮副球菌DN-3和/或甲基杆菌SDN-3”与“副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4、施氏假单胞菌FSTB-5中的至少一种”两类菌的菌体体积比为1:1-5。

3.根据权利要求1或2所述的菌剂，其特征在于：菌剂中同时含有副球菌FSTB-2和施氏假单胞菌FSTB-5。

4.根据权利要求1或2所述的菌剂，其特征在于：菌剂中同时含有脱氮副球菌DN-3、甲基杆菌SDN-3、副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4和施氏假单胞菌FSTB-5五株菌。

5.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：菌剂中含有适宜的营养物质和保藏助剂。

6.权利要求1所述耐盐脱COD脱氮微生物菌剂的制备方法，其特征在于包括以下内容：

（1）将副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4和施氏假单胞菌FSTB-5分别接种于FSTB固体培养基上进行活化；将脱氮副球菌DN-3和甲基杆菌SDN-3分别接种于对应固体培养基上进行活化；

（2）用接菌环取平板上的副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4和施氏假单胞菌FSTB-5菌落分别接种于相应的FSTB液体培养液中，用接菌环取平板上的脱氮副球菌DN-3和甲基杆菌SDN-3菌落分别接种于相应的液体培养液中，在温度20-40℃、150-240rpm条件下培养24-72小时至对数生长期，获得液体菌剂种子液；

（3）将上述种子液放大培养后收集菌体，按所需的比例混合，即为本发明所述的耐盐微生物菌剂；

其中副球菌FSTB-2、北见微杆菌FSTB-4和施氏假单胞菌FSTB-5的菌体活化和种子液培养所使用的FSTB液体培养基配方为：FeSO₄•7H₂O 25mg/L，NH₄NO₃ 286mg/L，KCl 929mg/L，CaCl₂ 2769mg/L，NaCl 21008mg/L，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，pH值为6.0-8.0；脱氮副球菌DN-3菌体活化和种子液培养所用的培养基配方为：KNO₃ 1g/L，丁二酸钠 8g/L，KH₂PO₄ 1g/L，FeCl₂ 0.5g/L；甲基杆菌SDN-3菌体活化和种子液培养所用的培养基配方为：硫酸铵0.5g/L，甲醇0.75mL/L，KH₂PO₄1g/L，FeCL₂0.5g/L；固体培养基是在上述液体培养基中加入2%琼脂。